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背景精神分裂症病理机制中免疫系统紊乱的作用受到研究者的日益关注。尸检研究发现精神分裂症患者脑内胶质细胞显著活化并伴有炎性细胞因子紊乱,可能导致大脑结构和功能损伤,诱发精神疾病。目前精神分裂症的免疫研究多关注成年时期,作为神经发育性疾病,阐明免疫稳态失衡与疾病的关系需要对其不同发育时期的机体免疫系统状态进一步探讨,以明确免疫紊乱参与精神分裂症病理机制的作用和地位。目的观察孕期感染聚肌胞苷酸(polyinsinic acid-polycytidylic acid, Poly (I:C))导致的精神分裂症大鼠模型青春期和成年期时行为学方面、脑内胶质细胞数量和形态方面、脑内炎性细胞因子IL-6、IL-1β、TNF-α蛋白质水平方面及脑白质髓鞘大体形态的不同,分析不同脑发育阶段机体免疫紊乱状态及其在精神分裂症病理机制中的作用。方法1.选择无特异病原体的5只SD雄鼠和20只SD雌鼠进行育种(10-11周龄)2.获得的16只孕鼠随机分为模型组(n=9)和对照组(n=7),分别于G9(确定怀孕后第9天)尾静脉注射lOmg/kg poly (I:C)和0.9%等体积生理盐水,注射结束后立即返回原笼中,注射3小时后各组随机选取3只动物作为质量控制,心脏取血检测孕鼠血浆中IL-6、IL-1β和TNF-a的蛋白质水平,以确定注射效果,余孕鼠无干扰生产。3.仔鼠离乳时(21日龄),根据亲代来源分为模型组(n=48)和对照组(n=40),均自然生长。4.分别在青春期(6周龄)和成年期(8周龄)时对两组仔鼠进行自发活动和Y迷宫的行为测定。5.免疫组织化学技术检测两组仔鼠在青春期(6周龄)和成年期(8周龄)时前额皮质和海马两个脑区内的神经胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein, GFAP)和钙结合蛋白1(ionized calcium binding adaptor molecule 1, Ibal)的阳性表达,采用劳克坚牢蓝(luxol Fast Blue, LFB)染色观察脑白质髓鞘大体形态的变化,酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)检测前额皮质和海马两种脑组织中IL-6、IL-1p和TTNF-α蛋白质表达水平。6.资料采用均数±标准差(x±S)表示。两组不相关样本比较采用独立样本t检验,非正态分布的两样本资料采用非参数检验中的两独立样本检验,多样本比较采用单因素方差(one-way ANOVA)分析,所有数据检测均为双侧检验,检验水准a=0.05。采用SPSS20.0软件对各组实验结果统计分析。结果1.模型组孕鼠血浆中IL-1β、IL-6和TNF-α的表达水平均明显高于对照组,差异具有统计学意义(p<0.05)2.自发活动中青春期模型组大鼠移动总路程和中心区域路程大于对照组,差异具有统计学意义(p<0.05)；成年期模型组大鼠移动总路程和中心区域路程均小于对照组,差异具有统计学意义(p<0.05)。各组大鼠性别之间差异无统计学意义(p>0.05)。3.Y迷宫实验中青春期模型组大鼠在起始臂停留时间大于对照组,在新异臂停留时间小于对照组,差异具有统计学意义(p<0.01),而在起始臂和新异臂中穿梭次数、其他臂中停留时间及穿梭次数与对照组相比差异不具有统计学意义(p>0.05)；成年期模型组大鼠在新异臂停留时间大于对照组,差异具有统计学意义(p<0.05),而在新异臂中的穿梭次数、起始臂和其他臂中停留时间及穿梭次数与对照组相比差异不具有统计学意义(p>0.05)。各组大鼠性别间差异无统计学意义(p>0.05)4.青春期时模型组额叶和海马中Ibal标记的小胶质细胞数量均高于对照组,差异有统计学意义(p<0.01)；成年期时模型组额叶和海马的小胶质细胞数量均高于对照组,差异具有统计学意义(p<0.01),两个时期模型组的不同脑区小胶质细胞均处于活化状态(胞体变大,突起缩短减少)。各组大鼠性别间差异无统计学意义(p>0.05)。5.青春期时模型组大鼠额叶和海马区域中GFAP标记的星形胶质细胞的光密度值与对照组相比差异不具有统计学意义(p>0.05),成年期时模型组大鼠额叶和海马区的GFAP标记的星形胶质细胞的光密度值高于对照组,差异具有统计学意义(p<0.01)。各组性别差异均无统计学意义(p>0.05)。6.青春期大鼠模型组额叶和海马脑匀浆中炎性细胞因子IL-6和IL-1p蛋白水平浓度均高于对照组,差异有统计学意义(p<0.05),而TNF-α蛋白水平浓度在模型组和对照组中均无明显变化,差异无统计学意义(p>0.05)；成年期时相比对照组,模型组大鼠前额皮质脑组织匀浆中炎性细胞因子IL-6和TNF-α的蛋白水平浓度均升高,差异有统计学意义(p<0.05),而海马脑组织匀浆中炎性细胞因子IL-6、IL-1β和TTNF-α的蛋白水平浓度则无显著变化,差异无统计学意义(p>0.05)7.青春期模型组大鼠脑内胼胝体区域光密度值较对照组低,与前额皮质和海马区小胶质细胞密度呈负相关,差异具有统计学意义(p<0.05,p<0.01),与星形胶质细胞则无相关性；成年期模型组大鼠脑内胼胝体区域光密度值较对照组低,与前额皮质和海马区小胶质细胞密度和星形胶质细胞相关蛋白表达呈负相关,差异具有统计学意义(p<0.05)。各组性别差异无统计学意义(p>0.05)结论1.模型组大鼠在青春期和成年期时均出现类精神分裂症样症状,其中青春期时模型组子代表现为自发活动量增多,对未知空间探索行为减少,和空间识别能力相对完好,而成年期时则表现为自发活动量和探索行为均减少以及空间识别能力受损。2.模型组大鼠在青春期和成年期时不同脑区中均存在小胶质细胞活化和部分炎性细胞因子的升高,星形胶质细胞的活化则仅出现于成年期,且青春期时模型组大鼠脑内炎性细胞因子相比成年期变化明显,表明孕期感染所致的精神分裂症大鼠模型在发育不同时期存在持续性大脑神经炎性反应,且发育早期更为显著。3.模型组大鼠在青春期和成年期脑白质均出现显著的脱髓鞘现象,可能与脑内炎性细胞的激活和炎性细胞因子的升高有关,是大鼠出现行为异常的重要因素,白质缺损可能是精神分裂症的主要病理表现之一。