玫瑰黄链霉菌Men-myco-93-63诱变菌株的筛选及其活性成分的研究

来源 :河北农业大学 | 被引量 : 2次 | 上传用户:klzhang
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
玫瑰黄链霉菌Men-myco-93-63是从马铃薯疮痂病自然衰退土壤中分离出的一株对多种植物病原菌有抑制作用的生防链霉菌。本文的主要目的是对本实验室前期诱变的734株菌株进行筛选,选取其中活性菌株,利用HPLC和TLC对其固体培养基中的主要成分进行分析。首先以棉花黄萎病菌为指示菌,对734株诱变菌株进行活性筛选,从20%甘油-20℃保存的诱变菌株176株中,筛选到10株有相对较好的抑菌活性的菌株,从斜面4℃保存的558株诱变菌株中筛选到6株相对较好的菌株,通过对这16株菌株进行传代,并结合HPLC对其活性成分进行检测,其中U90″菌株活性成分与出发菌株有差异,且抑菌效果相对较好,确定菌株U90″为进一步研究的对象。用十种不同溶剂对其固体培养基中活性成分进行提取,结果发现,去离子水提取液无抑菌作用,丙酮和乙酸乙酯提取液有较强的抑菌作用,乙酸乙酯提取液抑菌效果最好,为脂溶性,其它几种浸提剂提取液略有活性,同时发现,提取液水洗,水相无抑菌活性;活性成分存在部位的测定试验结果表明,活性成分既存在于菌丝体中又存在于培养基中;在此基础上,进行了丙酮和乙酸乙酯混合提取剂筛选试验,确定了活性成分分离的最佳提取剂为乙酸乙酯与丙酮3:1(v/v)的混合提取剂。对诱变活性菌株U90″抑菌活性成分进行纸层析试验,根据纸层析归类图谱可以看出,此种活性成分属于第六类放线菌素类抗生素。利用HPLC对所筛选到的诱变菌株活性成分的粗提品进行检测,发现三组对棉花黄萎病菌有较好抑制作用的活性组分,最大吸收波长分别为275.7nm,360nm和198.1nm,其中对275.7nm处活性物质进行HPLC洗脱,发现三组比较好的分离条件:(1)50%-80%(乙腈:水),1%/min,进样量5μL,原液pH6;(2)50%-60%(乙腈:水),0.25%/min,进样量5μL,原液pH 6:(3)20%-50%-60%(乙腈:水),2%/min,进样量3μL,pH7。对360nm和275.7nm处组分主峰制备回检发现,前后色谱峰保持一致,推测两组物质均为互变异构体。薄层分析表明甲醇:氯仿为1:6是粗提抗生素薄层层析的最佳展开条件,可分离出9个组分,其中5个组分对棉花黄萎病菌具有抑菌活性,回收产物TLC和HPLC分析表明薄层分离制备的抗生素组分Ⅲ纯度较高,组分Ⅲ紫外光谱最大吸收波长为194.6nm和258.0nm。
其他文献
《实用肿瘤杂志》2015年第1期至第6期专题讨论栏目分别拟定以口腔癌相关的临床与转化医学研究、头颈部肿瘤放射治疗中正常组织保护研究进展、微创在结直肠癌治疗中的临床应用
伴随着我国金融改革步伐的加快,自去年下半年有关部门相继出台了《关于向外商转让上市公司国有股和法人股有关问题的通知》、《合格境外机构投资者境内证券投资管理暂 With
链霉菌(Streptomyces)BM10菌株是由本实验室于2005年从海南霸王岭原始森林土壤中分离筛选得到的一株生防菌,前期研究结果表明,BM10菌株发酵液无菌滤液对香蕉枯萎病菌1、4号小种
2007年年初,冬季的寒冷还没有完全退却,在顺义一个果园,作为科技协调员的丁万库就已经开始为果农们讲解修剪冬枝的注意事项,为在新的一年中,果农们能有一个好的收成打下基础.
近年来,中国长江流域以南沿海沙梨产区新发生一种被称之为“梨黑色斑点病”的叶部病害。该病造成梨树叶片大量异常脱落,不仅削弱树势,影响当年梨产量和品质,造成严重的经济损
马铃薯(Solanum tuberosum L.)在全国粮食生产中的地位日益重要,市场需求量不断攀升,但是我国马铃薯单产水平不高、土传病害日益严重。因此,研究具有固氮、抗病、抗逆、促生
随着新课程改革的发展及教学改革的发展,现阶段的高中地理课堂教学过程中越来越重视培养学生们的综合地理素养,在高中地理课堂教学过程中,教师应该以生为本,注重学生自主学习
期刊
香蕉褐缘灰斑病(Sigatokaleafspotdiseases)是影响香蕉(Musaspp.)生产与发展的一个重要因素,主要由生球腔菌(Mycosphaerellamusicola)、斐济球腔菌(Mycosphaerellafijiensis)
工程预结算的审核是合理确定工程造价的必要程序及重要手段,也是控制工程造价的一个重要环节,如果这一环节控制不好,就易造成工程偷工减料,以次充好,给竣工项目日后使用带来
社会主义和谐社会,是在中国特色社会主义社会道路上,中国共产党领导全体人民共同建设、共同享有的和谐社会。共建共享和谐社会是推进和谐社会建设的重大原则,也为建设和谐文化指