刺梨标准提取物及其抗氧化活性研究

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刺梨系蔷薇科药食两用植物缫丝花Rosa roxburghii Trat的果实,是卫计委较早公布的食品新资源品种之一,具有消食健脾,收敛止泻的功效,主要用于治疗积食腹胀,泄泻等疾病。现代研究发现,刺梨在抗氧化、抗癌防癌、降低重金属负荷、调节机体免疫功能、镇静、延缓衰老、抗动脉粥样硬化等方面表现出一定作用。为此在市场上出现了品种繁多的刺梨产品,其中以其提取物为原料(如刺梨浓缩汁、饮料等)的产品占市场销售品种的绝大多数。作为食品新资源,辅以药用,市售刺梨产品及提取物均未见其标准提取物相关制备方法与品质评价。鉴于此,本文拟在建立刺梨中总三萜、总黄酮、维生素C含量测定方法的基础上开展标准提取物提取工艺研究,并通过体外抗氧化活性测试对标准提取进行初步的品质评价,从而为刺梨标准化工业生产提供参考。主要研究内容及结果如下:1、采用紫外可见分光光度法、2,6-二氯靛酚滴定法测定了刺梨鲜果中维生素C的含量,结果两种方法测定得到的Vc含量差异很大,前者测得的刺梨鲜果中Vc的平均含量为2.83 mg/g,后者测得为15.93 mg/g。紫外可见分光度法测得的刺梨提取物中总三萜的含量为24.73%(乙醇提取部位R-C)、57.90%(总三萜部位R-S);总黄酮的含量在提取物中的含量很低,采用紫外可见分光光度法未检测出。2、以总三萜的含量为检测指标,采用单因素实验和正交试验(L934)法考察乙醇浓度(A)、料液比(B)、提取时间(C)、提取次数(D)对刺梨总三萜含量的影响,优选刺梨总三萜最佳提取工艺条件,结果表明,刺梨总三萜提取工艺为:75%乙醇,提取1.5小时,提取3次,料液比为1:15。3、利用可见分光光度法、WST-1法对刺梨果以及刺梨提取物不同部位的体外抗氧化活性(清除DPPH自由基、清除羟基自由基、清除超氧阴离子自由基)以及SOD活性进行测定,结果紫外可见分光光度法表明刺梨提取物不同部位对DPPP自由基具有较强的清除作用,且清除率随质量浓度的增加而增加,在质量浓度0.02-0.2 mg/mL之间,对DPPH自由基的清除能力依次为乙醇提取部位>总三萜部位>对照品Vc>水溶性部位(R-L),在0.4-0.8 mg/mL之间依次为总三萜部位>对照品Vc>乙醇提取部位>水溶性部位;对羟基自由基的清除能力弱于阳性对照Vc,清除能力依次为对照品Vc>总三萜部位>乙醇提取部位>水溶性部位;在质量浓度1.0-3.0 mg/mL区间,对超氧阴离子的清除能力依次为对照品Vc>总三萜部位>乙醇提取部位>水溶性部位。WST-1法的结果表明刺梨组织样液对SOD的抑制率随稀释倍数增加而增大,4倍稀释时SOD抑制率为最大97.24%,之后随着稀释倍数增加抑制率开始下降;SOD活力随稀释倍数增加而增加,10倍稀释时达到1547.6 U/g。综上,本文所用检测方法简单、易行、准确,可用于控制刺梨中相应成分的质量;所研工艺科学、合理、可用于工业化生产;所评品质客观、安全,为进一步合理开发该品种提供参考。
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