高产壳聚糖酶菌株的筛选、鉴定及发酵产物的研究

来源 :浙江大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:winter2009
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从自然界中筛选获得一株高产壳聚糖酶的微生物菌株C-17,经鉴定属于不动杆菌属(Acinetobacter),是目前所见报道的唯一产壳聚糖酶的不动杆菌。通过对Acinetobacter sp.C-17发酵条件的研究,确定了最佳产酶发酵条件为:发酵温度30℃、培养基pH7.0、壳聚糖底物浓度为1%、250ml三角瓶中培养基装量为75—100ml、接种量为10%。在上述培养条件下,24h时摇瓶中发酵液的最高酶活力达1.7U/ml。在3L发酵罐中扩大培养,发酵液的最高酶活力高达2.8U/ml,是迄今所见报道中最高的发酵液壳聚糖酶活力。该壳聚糖酶是一种诱导型的胞外酶,最适反应温度为36℃,最适反应pH为7.0,酶在40℃以上易失活,但在pH4.0一10.0的环境中比较稳定。采用(NH42SO4盐析法和ZnAc2盐析法对Acinetobacter sp.C-17菌株的发酵液中的壳聚糖酶进行粗提,所得样品经SDS-PAGE分析,结果显示该酶的分子量约为35.4kD。对Acinetobacter sp.C-17菌株的发酵液的生理活性进行了初步研究,发现发酵液中的壳寡糖能在一定程度上促进水稻幼苗的生长。
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