谷氨酸囊泡转运体在卵巢癌癌痛中作用机制的研究

来源 :河北医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:gzliuwei2008
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目的:1研究卵巢癌原位移植模型鼠脊髓背根神经节(Dorsal root ganglia,DRG)中II型谷氨酸囊泡转运体(Vesicular glutamate transporter 2,VGLUT2)的表达。2内皮素激动剂及拮抗剂对小鼠DRG中VGLUT2的影响。方法:1挑选5周龄未交配雌性昆明小鼠50只,25g左右,利用随机数字表法,将小鼠分为5组(n=10),分别为假手术组、模型对照组、模型ET-1组、模型BQ123组、模型BQ788组。模型对照组利用背侧入路法将小鼠腹水瘤S180肿瘤细胞原位种植于小鼠左侧卵巢。药物组分别于建立模型后第8天、10天、12天、14天进行药物干预。模型ET-1组利用内皮素受体激动剂ET-1进行干预,模型BQ123组指鞘内注射内皮素A受体(Endothelins A Receptor,ETAR)拮抗剂BQ123,模型BQ788组则给予内皮素B受体(Endothelins B Receptor,ETBR)拮抗剂BQ788。2行为学测试:各个组别的小鼠分别于建立模型前、建立模型后第7天、9天、11天、13天测量机械性缩足反应阈值及热缩足反应潜伏期。3建立模型第14天给药后处死小鼠,取腰段DRG。利用免疫组化法检测不同组别VGLUT2的平均光密度值(Mean optical density,MOD)。利用蛋白免疫印迹法测定各组别VGLUT2蛋白表达的不同。结果:1.行为学实验:模型组小鼠较假手术组小鼠的机械痛阈和热痛阈自建立模型后第7天开始下降。模型ET-1组自给药后,与模型对照组比机械及热痛阈都显著下降(P<0.05)。给予BQ123后,小鼠的机械和热痛阈值较模型对照组有所提高(P<0.05),未恢复至正常水平(P<0.05),与ET-1组、BQ788组对比痛阈有所升高(P<0.05)。BQ788组小鼠的机械和热痛阈值比模型对照组高(P<0.05),比假手术组低(P<0.05),与ET-1组对比上升(P<0.05)。2.免疫组织化学:模型对照组VGLUT2的MOD值较假手术组增大(P<0.05)。模型ET-1组DRG中VGLUT2高于模型对照组(P<0.05)。BQ123组DRG的VGLUT2的MOD较模型对照组下降(P<0.05),比模型ET-1组、BQ788组都着色浅(P<0.05)。BQ788的VGLUT2 MOD较模型对照组无显著差别(P>0.05),比模型ET-1着色浅(P<0.05)。3.蛋白免疫印迹:模型对照组VGLUT2的表达量较假手术组增多(P<0.05)。模型ET-1组比模型对照组VGLUT2蛋白含量多(P<0.05)。模型BQ123组VGLUT2的表达量比模型对照组少(P<0.05),与模型ET-1组比降低(P<0.05),也低于BQ788组(P<0.05)。模型BQ788组VGLUT2的表达量与对照组比较无明显差异(P>0.05),低于模型ET-1组(P<0.05)。结论:1.VGLUT2在假手术组和模型组有差异,模型对照组明显多。2.ET-1组VGLUT2比BQ123、BQ788组表达都高,BQ123组的VGLUT2比BQ788组低。
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