【摘 要】
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大肠癌是最常见的恶性肿瘤之一,传统治疗方法是以手术治疗为主,同时辅以化疗、放疗的治疗方案,虽然对Ⅰ期和Ⅱ期大肠癌有一定疗效,但仍有20%左右的患者失去手术机会,而化疗和
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大肠癌是最常见的恶性肿瘤之一,传统治疗方法是以手术治疗为主,同时辅以化疗、放疗的治疗方案,虽然对Ⅰ期和Ⅱ期大肠癌有一定疗效,但仍有20%左右的患者失去手术机会,而化疗和放疗对肿瘤非特异性,且敏感性差,副作用大,效果欠佳。因此大肠癌的基因治疗一直是研究的热点。RNA干扰技术于2001年成功用于哺乳动物细胞,现在RNA干扰已经成为研究基因功能的有效方法,并有发展成为特异性治疗手段的趋势。目前,应用RNAi技术沉默STAT3基因抑制大肠癌细胞的生长,在国内外尚未见报道。本研究以基因重组技术构建pSilencer3.1-H1-siRNA-STAT3重组质粒;应用真核细胞转染技术转染人大肠癌细胞株HCT8进行体外研究;应用HCT8复制裸鼠移植大肠癌模型,应用电转染技术将pSilencer3.1-H1-siRNA-STAT3注入瘤体内观察抑瘤作用。本研究构建了pSilencer3.1-H1-siRNA-STAT3重组质粒,酶切法证明构建成功;MTT法证明pSilencer3.1-H1-siRNA-STAT3对HCT8细胞有抑制作用;流式细胞技术证实其可诱导HCT8细胞凋亡;RT-PCR与Western blot分析表明,pSilencer3.1-H1-siRNA-STAT3在mRNA水平及蛋白质水平特异性抑制了STAT3的表达;体内实验表明pSilencer3.1-H1-siRNA-STAT3可明显抑制裸鼠移植大肠癌的生长。因此,本研究表明RNAi技术沉默STAT3基因具有明显的抗大肠癌作用。
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