鸡病毒性关节炎病毒增殖特性与间接ELISA抗体检测方法的建立研究

被引量 : 0次 | 上传用户:mucao_xkhl
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
本研究对鸡病毒性关节炎病毒(ARV)鸡胚增殖特性进行了探索,建立了检测该病抗体的间接ELISA方法,为开展该病的病原分离鉴定、疫病诊断和流行病学调查奠定了基础。种毒经鸡胚增殖后收集尿囊膜毒、尿囊液毒、卵黄液毒和胚体毒,再分别接种卵黄囊,以胚体毒致死鸡胚的时间最短,尿囊膜毒致死鸡胚的时间最长;病毒经氯仿处理后接种卵黄囊,鸡胚死亡时间比未经氯仿处理的对照组推迟15h,说明病毒对氯仿具有一定的敏感性;病毒经卵黄囊、尿囊腔和尿囊膜3种途径接种鸡胚,最早死亡时间分别为51h、53h和56h。将ARV鸡胚毒分别用50%饱和(NH4)SO4沉淀、10%PEG6000沉淀和差速离心纯化,测得蛋白含量分别为8.699mg/ml、17.684mg/ml和5.35mg/ml,其中,前2种方法杂蛋白含量相对较高。差速离心的样品,电镜下观察到了大量规则排列的病毒粒子,无囊膜,有双层衣壳,直径约为75nm。以差速离心纯化的病毒作为包被抗原,建立了检测ARV抗体的间接ELISA方法,确定了抗原最佳包被浓度为252μg/ml,1%BSA封闭1.5h,血清最佳工作浓度为1:160,37℃反应1.5h,酶标兔抗鸡的稀释度为1:5000,37℃作用1h,底物37℃作用15min。特异性试验结果表明,NDV、IBDV、支原体的阳性血清OD值均小于ARV阴阳性血清的临界值,与抗原没有交叉反应;未加ARV抗原阻断的对照ARV阳性血清的OD值大于抗原阻断的阳性血清的OD值,而加ARV抗原阻断的各稀释度的阴性血清OD值较接近;人工感染鸡在接种ARV鸡胚毒7d、15d、20d和25d用间接ELISA进行抗体检测,均能检出血清抗体阳性,能检出血清的最高稀释倍数为1:640,比对照试验具有更高的敏感性。
其他文献
通过对重庆主城区两江江段2006-2010年主要代表监测断面水质监测数据的统计分析,采用单因子评价方法对试验性蓄水前后整体水质进行评价,以各月水质类别占全年比例的变化来反
<中华人民共和国职业病防治法>颁布实施以来,我们依照该法律的有关规定,开展职亚健康查体工作有了长足的进展,现将点滴经验总结如下.
该项研究选了适合当地气候条件的扁穗冰草、柠条、星星草等八种灌木和草本,从2005年7月至2006年11月在青海省(西)宁-大(通)高速公路边坡进行,目的是为青海省高速公路边坡选择
本文共分为三个部分:第一部分是前言,第二部分是正文,第三部分是结语。前言部分主要介绍了写作本文的目的和研究方法。写作本文的目的主要有以下几个:第一,当前我国正在建设
<正>众所周知,化学以实验为基础,而对于初学化学的学生来说,化学实验就像魔术一样神奇,变幻莫测的现象紧紧扣着他们的好奇心、求知欲,因此,利用好化学实验就能激发学生的学习
利用2006—2010年我国44个省市的880项投资事件的数据,研究了风险资本集聚、投资行业分布与区域创新三者之间的相互关系。结果显示:国内各地区的风险资本集聚可能通过影响地
一、食品企业计量器具监督管理现状1.多数中小食品企业对计量管理工作意识淡薄、认识不足按照《计量法》以及食品企业生产许可审查通则/细则的要求,食品企业的计量器具需经过
文章运用基于标杆管理的数据包络分析方法,对城市用地扩张控制过程的绩效进行了评价。研究表明,我国当前城市用地扩张控制过程绩效普遍较低,控制效率低下。控制失效主要表现为地
物理学科是以实验为基础的一门学科,在实验中让学生学会科学探究远比记忆一些实验结论重要的多。“上科版”初中物理教材突出了实验过程的探究。所以教师应该很好理解和应用
油桐原产于我国,是重要的木本工业油料树种;随着时代的发展,作为生物能源树种的油桐其开发与利用价值越来越高;随着旅游业的发展,油桐的旅游观赏功能日益显现,可望成为重要的