菌糠多糖纳米硒的制备及其对水稻的促生效果研究

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食用菌菌糠(spent mushroom substrate,SMS)是食用菌栽培后的剩余基质,其成分中含有多糖类、氨基酸类、生物活性酶等生物活性物质,具有极高的利用潜力。我国是食用菌生产大国,每年有年高达百万吨的菌糠产生,但是菌糠的合理利用和开发问题还未得到完善的解决。本研究以茶树菇菌糠为原料,首先提取菌糠中的多糖,并以所得多糖为模板制备多糖纳米硒复合物,进而探究菌糠多糖-纳米硒复合物对水稻的促生效果,为菌糠资源的开发利用提供参考。本论文主要研究结果如下:(1)采用热水浸提法提取了茶树菇菌糠中的多糖,粗多糖的得率为11.8%,在粗多糖中总糖含量为75.15%、灰分含量为1.7%、脂肪含量为2.23%,多酚含量为0.02%。体外抗氧化活性测定表明茶树菇菌糠多糖具有较好的抗氧化能力,可有效清除羟基自由基、超氧阴离子自由基以及DPPH自由基。经DEAE-Cellulose-52和Sephadex G-100柱层析对茶树菇菌糠多糖进行分离纯化和结构解析,得到两个主要的多糖组分(SMS-1和SMS-2),由紫外扫描结果可知多糖组分无明显的核酸和蛋白质吸收峰,红外光谱吸收结果表明分离组分SMS-1和SMS-2的特征吸收峰与多糖相似,均具有典型的特征吸收峰且菌糠多糖组分SMS-1还具有吡喃环和β-糖苷键。采用气相色谱法对茶树菇菌糠多糖组分进行单糖组成分析,结果表明SMS-1是由甘露糖、葡萄糖、半乳糖组成的,SMS-2是由甘露糖、木糖和半乳糖组成的。(2)以得到的菌糠多糖为稳定剂和吸附剂制备菌糠多糖-纳米硒复合物,探究制备菌糠多糖-纳米硒复合物的条件,同时研究其抗氧化能力和对水稻种子萌发和幼苗生长的促进效果。试验结果表明,当茶树菇菌糠多糖占比为10%、Vc与亚硒酸钠配比为4:1,反应4 h,反应温度为50℃时可获得均一稳定的菌糠多糖-纳米硒复合物,所得产物具有较高的体外抗氧化活性,对清除羟基自由基、超氧阴离子自由基以及DPPH自由基三种自由基的IC50相比茶树菇菌糠多糖均有显著降低,并且显著促进了水稻种子的发芽势和发芽率,进一步研究表明,叶面喷施和根部添加两种方式都可以显著促进水稻幼苗的生长,且促生效果高于单一的菌糠多糖。其中,叶面喷施20 mg·m L-1菌糠多糖-纳米硒复合物相比根部添加菌糠多糖-纳米硒复合物提高了水稻的可溶性糖含量,地上部的含量相比空白对照组增加了250%,可溶性蛋白的含量是对照组的3倍,叶绿素a、叶绿素b以及胡萝卜素相比空白对照组分别增加了67%、58%、21%。(3)叶面喷施不同浓度的茶树菇菌糠多糖-纳米硒复合物可以在提高水稻的根系活力、脯氨酸含量以及抗氧化酶活性,其中20 mg·L-1的菌糠多糖-纳米硒复合物的水稻幼苗根系活力相比对照组提高了36.37%。此外,菌糠多糖-纳米硒复合物也不同程度的提高了SOD、POD、CAT等抗氧化酶活性、降低了水稻幼苗中MDA的含量,增强了水稻的抗逆能力。水稻幼苗各器官的N、P、K含量均随着多糖-纳米硒复合物的喷施而有所提升,同时水稻幼苗地上及地下部中Fe、Mn、Cu、Zn等微量元素含量也显著高于未喷施菌糠多糖-纳米硒复合物的水稻幼苗,且随着水稻生长周期的增加,叶面喷施菌糠多糖-纳米硒复合物对水稻的促生效果也愈加明显。
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