【摘 要】
：
研究目标:观察新型AKT-S6K1双重抑制剂AT7867抗人结直肠癌细胞作用,明确其作用机制研究方法和内容:1.经不同浓度AT7876处理不同时间后,四甲基偶氮唑蓝（MTT）法、台盼蓝（Trypan blue）染色法、细胞集落试验（Clonogenicity assay）检测结直肠癌细胞存活、死亡及细胞增殖的变化。2.经不同浓度AT7876处理不同时间后,Caspase试剂盒方法、Annexin
论文部分内容阅读
研究目标:观察新型AKT-S6K1双重抑制剂AT7867抗人结直肠癌细胞作用,明确其作用机制研究方法和内容:1.经不同浓度AT7876处理不同时间后,四甲基偶氮唑蓝（MTT）法、台盼蓝（Trypan blue）染色法、细胞集落试验（Clonogenicity assay）检测结直肠癌细胞存活、死亡及细胞增殖的变化。2.经不同浓度AT7876处理不同时间后,Caspase试剂盒方法、Annexin V-碘化丙啶（PI）流式细胞仪法及Histone DNAELISA法检测结直肠癌细胞凋亡的变化。3.运用免疫印迹（Western blot）方法检测AT7876处理后结直肠癌细胞AKT等信号通路水平的活化水平变化。4.导入持续活化的AKT质粒（CA-AKT1）恢复AKT活化,检测AT7876体外抗结直肠癌细胞效果的变化。5.敲减AKT后,检测AT7876体外抗结直肠癌细胞效果的变化。6.检测AT7876处理后结直肠癌细胞SphK1活性水平变化。7.检测AT7876处理后结直肠癌细胞神经酰胺含量变化及神经酰胺对结直肠癌细胞毒作用。8.敲减AKT后检测AT7876处理后结直肠癌细胞SphK1活性水平及神经酰胺含量变化。9.建立裸鼠荷瘤模型,观察AT7876在体内抗结直肠癌细胞的效果及其对肿瘤组织内AKT-S6K1活性的影响。研究结果:1.AT7867浓度时间依赖性的抑制人结直肠癌细胞（HT-29,HCT-116,DLD-1细胞株）及原代人结直肠癌细胞的存活和增殖,诱导癌细胞死亡。AT7867对正常人结肠上皮细胞无显著毒性作用。2.AT7867浓度时间依赖性的诱导结直肠癌细胞凋亡。3.AT7867阻断结直肠癌细胞内AKT-S6K1,而导入持续活化的AKT仅部分抑制AT7867诱导的结直肠癌细胞凋亡。4.AT7867浓度依赖性的抑制HT-29细胞的SphK1活性。诱导神经酰胺生成。神经酰胺参与AT7867对HT-29的细胞毒作用。5.CA-AKT1活化组与非活化组,AT7876处理的结直肠癌细胞SphK1活性水平及神经酰胺含量无明显差异。6.敲减AKT前后,AT7876处理的结直肠癌细胞SphK1活性水平及神经酰胺含量无明显差异。7.AT7867腹腔注射抑制裸鼠中HT-29肿瘤生长。8.AT7867给药的肿瘤组织内AKT-S6K1活性显著下降。研究结论:AT7867通过AKT依赖性和非AKT依赖性机制（SphK1）抑制人结直肠癌细胞。
其他文献
目的:1.评估正常膀胱上皮细胞和不同恶性程度的膀胱癌细胞株SENP2的表达水平以及SENP2对膀胱癌细胞EMT的影响,探讨其作为治疗靶点的临床价值。2.探讨SENP2通过TGF-β/Smad信号通路抑制膀胱癌细胞EMT的具体作用机制,从而为SENP2作为治疗靶点提供更加充分的依据。3.研究miR-495在膀胱癌发生发展中的作用及作用的具体机制,并研究接受miR-495抑制作用的具体靶基因,为进一步
神经胶质瘤来源于神经胶质细胞,起源自神经外胚层,是颅内最常见的原发性恶性肿瘤,具有发病率高、复发率高、病死率高的特点。其不可控的增殖以及对化疗药物不敏感是胶质瘤病情进展快、生存期短及难以根治的主要原因,目前对胶质瘤的治疗仍以手术及术后放化疗为主,而目前的治疗方案并不能显著抑制肿瘤的复发、改善患者的预后、延长生存期。肿瘤的增殖和耐药多由于抑癌基因的失活及癌基因的异常激活导致,因此更加全面的了解肿瘤细
研究背景目前全球约1/3癫痫患者为耐药性癫痫（DRE）,脑内多药耐药基因1（MDR1）编码的P-糖蛋白（P-gp）过表达是导致癫痫患者耐药的主要原因之一,抑制癫痫脑P-gp过表达是未来临床治疗DRE方向之一。我们先前研究发现,癫痫发作能够导致脑组织明显炎性反应,而脑组织炎症反应中的关键因子—核转录因子-κB（NF-κB）炎性通路能够促使癫痫鼠脑内P-gp过表达,抑制NF-κB活性能够下调癫痫脑内P
结直肠癌（colorectal cancer,CRC）是消化系统常见的恶性肿瘤之一,其发病率在全球发达地区高于发展中国家。近年来,然而随着饮食结构和生活方式的改变,我国结直肠癌发病率逐年上升,成为严重影响居民身体健康和生活质量的疾病之一。随着医疗技术的发展,通过结直肠镜检、粪便潜血实验等检测手段,结直肠癌的检出率明显增加,干预和治疗手段使结直肠癌的死亡率得到有效的下降。然而,由于结直肠癌早期症状隐
恶性肿瘤是危害人类健康的重大疾病之一。根据世界卫生组织国际癌症研究署（International Agency for Research on Cancer,IARC）2012 年的估计,每年全球新发恶性肿瘤1400余万,约800万人死于恶性肿瘤。在我国,自2010年来恶性肿瘤已经超过心脑血管疾病成为第一大死因,成为中国最主要的公共卫生问题,其中肺癌居肿瘤死亡率首位。由于我国人口基数巨大（13.7
精神分裂症是一组病因尚不明确的重性精神类疾病,一般涉及感知觉、学习记忆、思维、情感和行为等多个方面的障碍以及精神活动的不协调等。精神分裂症和高危青年中涉及嗅觉敏感性、气味识别、嗅觉分辨和嗅觉记忆等功能障碍,并且这些嗅觉障碍常常出现在起病时。其中嗅觉分辨的缺失广泛存在于精神分裂症患者中,并且和疾病的发展密切相关。因此,研究嗅觉分辨的机制对精神分裂症的早期诊断和治疗具有重要意义。NRGs（Neureg
背景:全球每年新发胃癌病例约100万例,其中47%的新发病例在中国,严重威胁人体健康和生命质量。幽门螺旋杆菌（Helicobacterpylori,H.pylori）是Ⅰ类致癌因子,目前据估计全球超过半数人口感染,而在我国各地自然人群中感染H.pylori的比例在41.35%-72.3%。其感染可导致胃粘膜发生慢性炎症,产生萎缩性胃炎,肠上皮化生甚至上皮内瘤变,这类癌前病变状态部分可发展为癌。因此
目的（1）研究地西他滨（decitabine,DAC）联合维生素C（vitamine,VC）改善老年急性髓系白血病（acute myeloid leukemi,AML）患者疗效和生存;（2）体外研究DAC联合VC对人白血病细胞株NB4、HL60增殖的影响及可能的机制,为临床AML的治疗提供一定的理论依据。方法首先我们回顾性分析了 2010年11月～2016年04月江苏省人民医院血液科收治的≥60岁
肺癌在我国是最常见的恶性肿瘤,占恶性肿瘤致死率第一位。其中约80%为非小细胞肺癌（non small cell lung cancer,NSCLC）,在 NSCLC 的治疗中,铂类起到非常重要的作用。其中顺铂使用历史最久,最广泛。但它的耐药问题却亟待解决。虽然目前有许多关于顺铂耐药的肺癌组织基因多态性的研究,但是直到现在没有一种遗传变异可以作为临床患者对铂类反应性的准确的预测标记。并且由于肿瘤组织
背景肺癌是全球发病率和死亡率最高的恶性肿瘤之一,其中约80%为非小细胞肺癌（non-small cell lungcancer,NSCLC）。在NSCLC的治疗中表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor,EGFR）酪氨酸激酶抑制剂（tyrosine kinase inhibitor,TKI）为代表的分子靶向治疗药物日渐突出。EGFR-TKI人群选择性强,目