背景喉癌（laryngeal cancer）是高发的恶性肿瘤之一,发病率约占全身肿瘤的1%～5%。近年来,喉癌的发病人数增加,但近二十年来喉癌患者的5年生存率并没有呈现增加的趋势。这可能是因为喉癌的发生和发展是一个复杂病理过程。所以,研究喉癌发生的具体分子机制对喉癌的诊断和治疗有至关重要的作用。生长停滞特异性转录因子5（growth arrest special 5,GAS5）是一种常见的长链非编码RNA（（long non-coding RNA,lncRNA））。近年来,许多学者发现GAS5在较多肿瘤中异常表达,并在肿瘤的进程中起着重要作用。但其在喉癌中的作用及机制仍不明确。PI3K/AKT/mTOR是已被确定是癌症重要的三个主要信号通路之一。该信号通路在肿瘤干细胞的自我更新以及对化学疗法或放射疗法的抵抗中起着重要作用,通过starbase database数据库发现GAS5与PI3K/AKT/mTOR具有较高的相关性。喉癌细胞是否存在GAS5的异常表达、是否通过PI3K/AKT/mTOR信号通路产生功能变化尚不明确。本研究拟通过对喉癌标本组织及喉癌肿瘤细胞系的研究,探索GAS5在喉癌发生发展中的作用及相关机制。目的1.检测GAS5在喉癌和癌旁组织中的差异性表达,探讨其临床特征相关性;2.检测GAS5对喉癌细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭等生物学行为的影响;3.检测GAS5异常表达对PI3K/AKT/mTOR信号通路的影响;方法1.自广东省人民医院耳鼻咽喉头颈外科收集40例喉癌和癌旁组织,分别采用实时荧光定量PCR检测其中GAS5差异表达情况及临床特征分析;2.在TU212和TU686喉癌细胞系中过表达GAS5,通过CCK-8、流式细胞术、Transwell实验及动物实验检测GAS5对喉癌细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭等生物学特性的影响;3.通过Western blot检测过表达GAS5后TU212和TU686细胞系中P13K/Akt/mTOR通路中PTEN、P13K、Akt、p-Akt、mTOR及p-mTOR蛋白的表达变化情况,探索其作用机制。结果1.GAS5在喉癌组织中被下调,其表达量越低,肿瘤分化越差,TMN分期越晚,淋巴结转移率越高,总生存时间越短。2.过表达GAS5后TU212和TU686喉癌细胞分裂被阻滞在G2/M期,细胞凋亡率增加,迁移和侵袭能力被抑制。3.过表达GAS5后,TU212和TU686喉癌细胞内PTEN表达水平增加,而P13K、p-AKT和p-mTOR的表达水平下降。结论1.喉癌组织中GAS5表达水平下降,其低表达与肿瘤的不良分化、晚期TMN分期、淋巴结转移和较短的总生存时间密切相关;2.GAS5在体内外均显示着抑制喉癌细胞增殖的功能,可能是喉癌发展过程中的抑癌基因;3.GAS5可能通过PI3K/AKT/mTOR信号通路抑制喉癌细胞的增殖和转移。