隔担菌相关盾蚧的微生物群落研究

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隔担菌和盾蚧形成一种拟定的互利共生关系,营养最终来源于寄主植物,影响寄主植物的生长和繁殖,造成农、林、园艺业的巨大经济损失。阐明隔担菌与盾蚧的互作关系,可为其生物防治提供可靠的理论基础。本研究通过比较被隔担菌侵染和未被侵染的盾蚧共生微生物群落结构的变化,找出了受到隔担菌侵染盾蚧影响的关键物种,从盾蚧微生物群落角度来阐明隔担菌与盾蚧的关系,取得了重要进展。对采自安徽、北京和云南的9个盾蚧样品(包括6个被隔担菌侵染的样品和3个未被侵染的样品),采用低营养、高倍稀释和长时间培养的方法分离微生物菌株,分离到的菌株数随着培养时间的延长而增多,最终达到饱和。9个样品共分离到真菌360个菌株,经过菌落形态分型和SSCP筛选,挑选了112个菌株进行了测序,以相似性97%为界限,共鉴定出57个分类单元(OTU)。对一个真菌从微观形态,菌落形态和系统发育三个方面进行了系统研究,鉴定并描述为新种,定名为Knufia aspidiotus。同时分离到细菌460个菌株,挑选97个代表菌株进行测序,鉴定出43个分类单元。在未被侵染的盾蚧样品中,没有发现明显的优势真菌,优势细菌是甲基杆菌,细菌和真菌群落的多样性指数,丰富度指数都明显高于被隔担菌侵染的盾蚧。在被侵染的盾蚧样品中,优势真菌是隔担菌,优势细菌是鞘氨醇单胞菌。明确了甲基杆菌和鞘氨醇单胞菌与隔担菌对盾蚧的侵染密切相关,根据已有的研究推测甲基杆菌与隔担菌相互拮抗而鞘氨醇单胞菌与隔担菌互利共生。用非培养法对1个被侵染的样品和1个未被侵染的样品的细菌群落进行了初步研究,共分析492个阳性克隆,经SSCP筛选了81个克隆进行了测序,分为23个分类单元。2个样品的优势种都为Candidatus uzinera,占80%,说明其与隔担菌对盾蚧的侵染关系不大,推测其为盾蚧含菌体bacteriome相关的细胞内细菌。
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