水稻OXS2基因家族的克隆及功能鉴定

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工农业的飞速发展已经对我国农田造成严重危害,重金属在土壤中不易降解,并在农作物中积累,被人类食用后可在体内富集,引起人类慢性疾病的发生。植物内重金属含量的增多,还会导致植物体内活性氧的产生和积累,形成氧化胁迫。植物抗重金属及氧化胁迫一直是重要的研究课题。酵母作为研究真核生物的模式生物,具有生长周期短、基因组小的优点,Robert Blanvillain(2011)等通过裂殖酵母表达拟南芥cDNA文库,找到了对重金属和氧化胁迫有耐受性的基因OXS2(OXIDATIVE S_TRESS2)。研究表明,AtOXS2编码一个具有锌指结构的转录因子,参与调控植物胁迫逃逸,同时调节植物对氧化胁迫的抗性。我们克隆了水稻的OXS2家族共四个同源基因,分别命名为OsOXS2a,OsOXS2b,OsO2L1和OsO2L2。将水稻OXS2基因家族转入酵母进行初步的抗性检测,结果表明OsOXS2a的表达使酵母产生对氧化剂二酰胺(diamide)的抗性;OsO2L1的表达使酵母产生对重金属镉和diamide的抗性;而表达OsO2L2则对H2O2胁迫产生了一定的抗性。同时该家族各基因的功能片段AT3在不同的胁迫环境下也表现出不同的反应,这些反应同其全长蛋白抗性不完全一致。通过RNA-seq技术,我们在酵母中找到了胁迫条件下OsO2L1诱导表达的差异基因,并对其进行了初步的验证和分析。同时,我们已将OsOXS2基因家族转入水稻中,进一步揭示该家族在植物中的功能及作用机制。这项研究将为培育抗重金属及氧化胁迫的水稻新品种提供理论依据。  
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