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脐血造血干细胞数量稀少,限制了其在成人患者中的应用。体外扩增是解决该问题、拓展造血干细胞临床应用范围的有效途径。但造血干细胞在体外培养过程中受到细胞因子等外界环境的刺激,使得细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平急剧升高。细胞内ROS可作为细胞内信号分子,参与调控细胞的增殖、分化、衰老及凋亡等生理活动,但过高水平的ROS不利于造血干细胞生理功能的维持。细胞内ROS水平的调控对体外培养中造血干细胞生理特性和功能的维持十分重要。为此,本文以脐血CD34+细胞为对象,在无血清培养体系中考察了白藜芦醇、儿茶素、人参皂苷、三七皂苷、葛根素、金丝桃苷、芦荟大黄素七种抗氧化物对体外培养CD34+细胞胞内ROS水平、CD34+细胞集落形成能力、总细胞和干/祖细胞扩增的影响。结果发现:抗氧化物降低了培养前期细胞内ROS水平,有助于提高CD34+细胞的集落形成能力;除芦荟大黄素外,添加其余抗氧化物均能在不影响总细胞扩增的前提下提高培养物中CD34+细胞比例。进一步以白藜芦醇为例,考察了抗氧化物对造血干细胞体外扩增特性、细胞生理状态及培养后细胞再扩增能力的影响。结果发现:与对照组相比,添加10μM白藜芦醇培养后总细胞扩增倍数无明显差异;但培养14d时,培养物中CD34+细胞的百分含量为31.5±7.3%,明显高于对照组的18.6±2.1%;总细胞中凋亡和老化细胞的比例分别为20.8±0.8%和32.2±2.8%,均明显低于对照组的24.6±0.9%和47.0±5.0%。此外,添加白藜芦醇培养后CD34+细胞的凋亡和老化比例分别为31.5±5.7%和2.5±0.4%,明显低于对照组的42.2土2.6%和5.7±1.4%;再扩增14d总细胞扩增了 44.9土 11.6倍,高于对照组的23.2±7.8倍。可见,添加10μM白藜芦醇促进了造血干细胞的体外扩增,有助于维持细胞的生理状态,提高了其再扩增能力。以上结果为优化CD34+细胞的体外培养过程提供了新的思路。