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本论文主要采用表面增强拉曼光谱检测技术,基于核酸适体与目标分子的特异性结合作用,结合链置换循环放大反应技术及DNA酶切循环放大技术,利用纳米金生物条码技术,建立了DNA、溶菌酶和肿瘤细胞等多种生物活性分子的高灵敏度、高选择性的传感分析检测的新方法,并为对其它生物分子的检测提供基础性研究资料。本论文的研究内容主要包括以下几个方面:1.本实验将内切酶循环放大与链置换循环放大反应相结合构建了一种表面增强拉曼光谱检测DNA的新方法。以金片为检测基底,拉曼信号标记的金纳米颗粒为检测探针,实现了DNA的高灵敏、高选择性检测。该方法通过靶DNA引发内切酶循环放大及链替换循环放大反应,在金基底上产生大量的拉曼探针,使拉曼信号显著增强,而且实验中使用磁性纳米微球,进行磁性分离,有效降低了背景信号值,在定量检测目标DNA时,检测限达2.7×10-14M,该方法操作简便、灵敏度高、选择性强、适用范围广,通过简单的改变DNA序列可用于其他代谢物、蛋白质,以及生物辅助因子的检测。2.本实验基于适体与靶蛋白质的特异性识别作用,结合酶循环放大技术,提出了靶向激活源头放大SERS检测溶菌酶的新方法。该方法通过溶菌酶对适体的靶向识别,引发了溶菌酶的聚合替换循环放大和DNA链聚合剪切循环放大,从而得到大量的与溶菌酶含量相关的带有拉曼信号标记的磁珠-纳米金生物条码探针复合物,采用表面增强拉曼光谱(SERS)实现对较低浓度溶菌酶的高灵敏度检测,检测限可达8.3×10-15M,为溶菌酶提供了一个更加简便、快速、高灵敏度检测的途径,该方法还具有广泛的适用性,在其它蛋白质及肿瘤标志物的检测领域具有广阔的应用前景。3.本体系构建了一种新型的基于工具酶循环放大SERS检测Romas细胞的方法。通过适体DNA对配体细胞表面蛋白质的高强度特异性结合,引入酶切循环放大的方法放大待测拉曼分子信号,并通过金基底,纳米金生物条码等将信号进一步加强。最终实现具有高灵敏度和高选择性的对靶DNA和淋巴瘤Ramos细胞的检测。该方法对靶DNA和淋巴瘤Ramos细胞的检测限分别可达2.1×10-15M和87个细胞。该检测方法在恶性肿瘤早期诊断和基因检测领域具有广阔应用前景。