犬细小病毒病是具有高度接触性的烈性传染病，既严重威胁着家养宠物的身体健康，又是对当前我国养犬业、毛皮动物养殖业和野生动物保护业危害较大的疫病。在犬细小病毒病诊断方法中，ELISA检测方法方便快捷、费用低廉，适于在基层推广采用F81细胞大量扩增犬细小病毒CPV-GN株，利用聚已二醇(PEG6000)浓缩后，测得其蛋白浓度的基础上。采用倍比稀释法获得一系列的蛋白浓度值，同时将阳性血清也倍比稀释，利用方阵滴定法进行酶联免疫吸附试验(ELISA)检测确定了抗原最佳的包被浓度为9μg／ml；阳性对照的血清稀释度为1：160。最适的封闭液为1.75％的明胶，封闭条件为37℃1h；待检样品与包被抗原的反应时间为37℃2h：酶标二抗的反应时间为37℃1h。经过一系列的验证试验，证明建立的间接ELISA方法具有较强的稳定性和特异性。取50份免疫犬血清，用该方法与常规的HI试验分别进行抗体检测，两者的共同符合率为94％。其中，明显阳性和阴性的样品，共同符合率能达到100％。说明建立的间接ELISA方法具有简便、快速、特异的优点。为了评估犬细小病毒的免疫情况，将建立的间接ELISA方法应用于140份犬细小病毒血清抗体的检测，而且一年后，对其中的60只犬再次采集血清进行检测。结果证明：现在采取的免疫程序，完全可以提供足够的保护力抵制犬细小病毒的感染。而且疫苗的免疫效果与犬的性别和品种没有太大的相关性，而犬的年龄在很大程度上影响着疫苗的免疫效果。以纯化的犬细小病毒(Canine parvovirus，CPV)CPV-GN毒株为免疫原，接种6周龄的Balb／c小鼠。最后一次加强免疫后3天，取小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞(SP2／0)融合。以纯化的CPV建立的间接酶联免疫吸附试验(ELISA)和中和试验(HT)筛选阳性克隆，并用有限稀释法进行亚克隆，用F81细胞包被板子进行ELISA检测，剔除与细胞蛋白交叉反应的阳性克隆，共获得3株CPV特异性杂交瘤细胞株A7、C5、E9。它们的中和效价分别为1；160、1；80和1；160。经过一系列鉴定，这3株单抗株(McAbS)均有很好的特异性和稳定性。利用A7单抗株制备单抗的腹水，间接ELISA和血凝抑制试验(HI)检测单抗腹水的效价分别为1：1280和1；640。在已经制备犬细小病毒单克隆抗体的基础上，将单抗加以辣根过氧化物酶标记，建立了双抗夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)检测犬细小病毒的方法。结果表明：单抗包被的最佳浓度为7ug／ml；最适的封闭液为1.75％的明胶，封闭条件为37℃1h：待检样品与包被单抗的反应时间为37℃2h：酶标单抗的反应时间为37℃1h；检测样品直接用生理盐水稀释后，即可检测。经过一系列的验证试验，证明建立的夹心ELJSA方法具有较强的稳定性和特异性。将建立的夹心ELISA方法应用于40份临床样品的检测，并且与血凝试验相比较，两者的共同符合率为92.5％。其中，明显阳性和阴性的样品，共同符合率能达到100％。对临床收集的20份粪便样品，利用建立的夹心ELISA方法进行检测，并且与PCR方法进行比较，对于检测结果不符合的样品接种F81细胞，观察病变情况，加以验证。