猪PRDX2和PRDX6基因的分离及遗传效应分析

来源 :华中农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:nyy1001
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
PRDX2和PRDX6基因同属于抗氧化蛋白超家族,该家族基因编码的蛋白能通过硫氧还蛋白还原过氧化物或超氧化物,消除代谢产生的过氧化物,发挥抗氧化和清除自由基的作用。本实验室在研究典型瘦肉型猪种(大白)和脂肪型中国地方猪种(梅山)两种不同品种猪骨骼肌形成的分子机理时,应用差异蛋白质组学筛选出了PRDX2和PXDR6两个差异蛋白。鉴于此,本研究选择PRDX2和PXDR6作为猪肌肉品质的候选基因,开展了基因结构、时空表达谱、多态性及性状关联分析等方面的研究,获得如下结果:1、获得猪PRDX6基因765 bp长度的cDNA序列,运用GENSCAN预测开放阅读框,其中编码区675 bp,预测编码224个氨基酸;利用猪PRDX6的cDNA全长在猪核酸数据库中进行比对,发现和猪9号染色体一个基因组克隆(pig clone CH242-230A16)完全匹配,发现猪PRDX6基因组全长达168 kb,包含5个外显子;通过Spidey程序以及不同物种间剪切位点的保守性分析基因结构,结果表明猪PRDX6基因的4个内含子的剪切方式均符合"gt-ag"法则。获得了猪PRDX2基因611 bp长度的cDNA序列,运用GENSCAN预测开放阅读框,其中编码区597 bp,预测编码198个氨基酸;利用猪PRDX2的cDNA全长在猪核酸数据库中进行比对,发现和猪2号染色体一个基因组克隆(pig clone CH242-275M24)完全匹配,发现猪PRDX2基因组全长达181 kb,包含6个外显子,5个内含子。通过Spidey程序以及不同物种间剪切位点的保守性分析基因结构,结果表明猪PRDX2基因的5个内含子的剪切方式均符合"gt-ag"法则。2、运用荧光定量RT-PCR分析猪PXDR6基因在不同品种间及不同发育时期的RNA水平上是否存在差异。实验结果表明:大白猪PRDX6基因在RNA水平上出生后4M高表达,和蛋白质组学得到的结果一致;大白猪PRDX2基因在RNA水平上出生后2M高表达,和蛋白质组学得到的结果(PRDX2蛋白在胚胎期65天高表达)不一致。3、运用荧光定量RT-PCR技术对PRDX2和PXDR6基因进行组织表达谱分析。结果表明:大白猪PRDX6基因在肝和股二头肌中高表达,在胃中中度表达,其他组织相对低表达。大白猪PRDX2基因在胃中高表达,肝和肾中中度表达,脾中低表达,在其他组织中相对低表达。4、对大白和梅山猪PRDX6基因序列对比,发现编码区第4外显子处有2个潜在的SNPs分别在第417 bp处(C/T突变)和第423 bp处(A/G突变),但均没有引起氨基酸的变化。采用焦磷酸测序方法对这两个位点在6个猪种和247头F2“大白×梅山”资源家系中作了遗传变异分析和性状关联分析。结果表明:C417T位点国外品种均以C等位基因为主,国内品种均以T等位基因为主,该位点与肌内脂肪、肌肉水分相关;A423G位点国外品种均以A等位基因为主,国内品种以G等位基因为主,该位点与失水率、系水力、肌内脂肪、肌肉水分相关。5、采用PCR方法扩增了猪PXDR6基因5’侧翼2000bp的序列,利用生物信息学方法预测了猪PXDR6基因CpG岛的分布和转录因子结合位点。6、猪PRDX6基因时空表达与此基因甲基化程度的相关性分析:(1)大白猪蛋白及mRNA表达量趋势基本一致,而其甲基化程度与表达量趋势相反,且在4M表达量最高,甲基化程度也相应明显最低。梅山猪表达量与甲基化程度不具有负相关性。(2)除脑、肾组织外,其他组织表达量与甲基化程度呈较好的负相关。
其他文献
顿巴斯矿区在矿井提升设计、施工和使用过程中广泛地采用了长度4m和5.2m的双层罐笼的提升设备,该罐笼带有端面布置滚轮导向装置(顿涅茨煤炭联合公司的“南顿巴斯”1~#、3~#
在我国华南,德国黑森州Justus Liebig大学植物营养系同广西农学院植保系共同进行了用4种新型植物生长调节剂BAS111、DCiB、EL500和Torpal C对水稻进行处理的合作研究,并获得
多糖是除蛋白质和核酸以外的另一类重要生物大分子,广泛存在于植物、动物和微生物中,其中植物多糖以其资源丰富、药理作用强、毒副作用小而成为当今医药研究与应用的热点。现代
1 问题的提出rn随着电子技术的高速发展,信息化时代的到来,计算机作为一种媒体被引入课堂,并由此产生了相对于常规教学的另一种教学方式--计算机辅助教学.
本文通过土培盆栽的试验方式,以10个日本引进的多花黑麦草(Lolium multiflorum L.)为试验材料,研究不同浓度土壤Cu2+处理(50mg/kg、300mg/kg)对不同多花黑麦草品种生长特性和氮素吸收利用方而的影响,探索牧草的耐铜生理、耐铜机制及牧草对氮肥的吸收利用差异,以期为上壤修复、食品安全和品种选择方面提供部分理论依据。研究结果表明:1、土壤低浓度Cu2+处理(50mg/kg
受计划经济影响较深的产业报,如何适应社会主义市场经济的新形势?不久前国务院49家产业报总编辑在京举行了研讨会。与会的产业报老总们认为,近年来产业报发展很快,但在赢得
民间美术是中国传统文化的重要组成部分,具有自己独特的、自成体系的造型法则和赋色技巧,对现代艺术设计具有现实的指导意义。对民间美术中传统哲学审美思想、造型观念和色彩
应法国《人道报》和德国《奥古斯堡会报》的邀请,本刊29个省市自治区的特约编委代表于8月中旬随中国职工报刊新闻采访团访问了西欧6国。本次出访适逢喜迎国庆50周年和世纪之
本文从采煤机工作机构的几何参数出发,通过随机载荷的计算机模拟,讨论了工作机构稳定性及截齿数的优选问题,对新产品的设计、已有产品的评价与改进都具有一定的指导意义。 B