龙眼(Dimocarpus longan Lour.)在酸雨胁迫下Ca信号传递及蛋白表达的初步研究

来源 :福建农林大学 | 被引量 : 8次 | 上传用户:doboho
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
本研究以一年生乌龙岭龙眼幼苗为材料,研究了酸雨胁迫下叶片CaM含量、H+-ATPase和Ca2+-ATPasc活性的变化、叶片特异蛋白的表达以及外源Ca2+的作用,探讨了龙眼叶片对酸雨胁迫的信息感受和传递机制。主要研究结果如下:1.优化了ELISA测龙眼叶片CaM含量的条件,结果表明,龙眼叶片的最佳的包被抗原浓度为5μg/ml,适宜的一抗稀释比例为1:3000,最适宜稀释倍数为40。2.不同的胁迫强度和胁迫时间影响叶片CaM含量、H+-ATPase和Ca2+-ATPasc活性的变化。在整个胁迫的过程中,CaM含量呈反复上升下降的变化趋势,但随着胁迫时间的延长,CaM含量的变化幅度逐渐下降。龙眼叶片胞质Ca2+-ATPase与H+-ATPase的活性对酸雨非常敏感,伴随模拟酸雨强度的加大其活性受到抑制。其原因可能是:细胞内较高浓度的H+的长期胁迫下,Ca-CaM信使系统逐渐受到破坏,ATP酶活性下降,导致了植物的抗性逐渐下降。3.当外源喷施10 mmol/L Ca(NO32作用于酸雨胁迫下的龙眼幼苗时,CaM含量、H+-ATPase和Ca2+-ATPasc活性均比无Ca(NO32处理高;Ca2+螯合剂EGTA则使CaM含量下降、H+-ATPase和Ca2+=ATPasc活性降低。CPZ能抑制H+-ATPasc和Ca2+-ATPase的活性。说明Ca-CaM系统在酸雨胁迫下起到信号传递的作用,Ca2+-ATPase和H+-ATPase的活性受CaM激活和调节,而喷施外源Ca2+则能促进信号传递的过程。4.利用Bio-rad公司的蛋白质图谱分析软件Quantity one和PDQuest对电泳图谱进行分析处理,得到的图谱背景清晰同时保持了数据的完整性。在本研究中,利用Quantity one软件计算SDS-PAGE图谱中蛋白质条带的分子量,并对不同处理组进行差异分析,得到各个处理间的相似率。利用PDQuest对2-DE电泳图谱进行处理,经过背景消减、点检测和匹配后,得到背景清晰的2-DE图谱、每张凝胶的蛋白点数以及差异蛋白点。5.利用SDS-PAGE分析酸雨胁迫下龙眼叶片特异蛋白的表达。从SDS-PAGE图谱可以看出,pH2.5酸雨胁迫15d后,分子量大约为23KD的蛋白特异表达,20d后,分子量大约为17KD蛋白表达增强。与pH2.5相比,pH3.5的酸雨对龙眼幼苗叶片蛋白表达影响较弱,但随着胁迫时间的增加,表达差异呈上升的趋势6.利用蛋白质双向电泳(2-DE)技术对样品进行进一步分析。结果表明,酸雨胁迫后特异表达的蛋白质组分有6个,其中C4(20.2KD pI6.0)在不同酸度酸雨的整个胁迫过程中表达,F(24KD pI6.35)在pH2.5酸雨胁迫15d后开始表达,20d后,在不同处理下均有表达,蛋白B3(22.3KD pI6.35)、B4(23.5KD pI6.5)、C5(21.8KDpI5.6)、C6(20.2KD pI5.6)的表达则与酸雨酸度、胁迫强度有关。蛋白B4(23.5KDpI6.5)仅在有外源Ca2+的处理组中表达,说明外源Ca2+与蛋白B4的表达有某种相关性。7.通过SDS-PAGE与2-DE分析发现,EGTA和CPZ处理下,有4个蛋白质组分表达增强,推测这4个蛋白质组分与龙眼响应酸雨胁迫的Ca-CaM系统有相关性。
其他文献
覆盖在大地上的郁郁葱葱的森林,是自然界拥有的一笔巨大而又宝贵的“绿色财富”。这些植物群落对二氧化碳含量下降、动物群落、水文湍流调节和巩固土壤起着重要的作用,是构成地
还记得《西游记》中孙悟空用自己的汗毛变成无数个小孙悟空的离奇故事吗?我们在电视机前观看这段画面时,是否会想到有一天自己也会有好多一模一样的“我”出现呢?科学在进步,
飞鸟不经意将我遗落人间,我睁开眼睛,发现自己已经身处幽静的深谷,这注定了我一生将与寂寞相伴.是的,我只是一株普通的昙花刺,但这不碍我追求梦想的决心.
期刊
少年时的梦像一朵永不凋零的花,随着岁月的流逝,我越来越怀念小学时代的快乐时光.走过操场,穿过绿树红墙的那一边不就是我小时候的学校吗?母校,我的母校,如果在世界上有时光
农作物病害是影响食品安全的世界性问题。通过利用抗病品种可以有效、经济和环境友好地解决这个问题。合理利用抗病资源需要全面理解植物抗病相关基因和调控元件的进化。本研
我国南方地区在葡萄果实发育和成熟期间高温多雨,光照相对不足,昼夜温差较北方小,常导致葡萄果实着色不良,降低了葡萄果实品质。本试验以红地球、无核白鸡心等两种果实颜色类型(
同学们经常遇到求代数式的值的问题,由于代数式含有字母,往往只给出字母的值或字母关系式,这类问题若采用直接条件代人的方法求解较繁琐,难找到突破口.下面就介绍几种代数式
材料是人类用于制造机器、构件和产品的物质,是人类赖以生存和发展的物质基础。材料科学技术的每一次重大突破都会引起技术和产业革命,给社会生产力和人类生活带来巨大变革。
一、look译为“瞧、看、望”常用来引起别人的注意;还可以译为“看起来”,常作连系动词,后接形容词构成系表结构.如:rnLook! They are playing basketball.看!他们在打篮球.r
据我所知,豆浆应当是中国第一饮品.传说豆浆是西汉淮南王刘安发明的,所以说豆浆距今已经近2000年的历史了.那么当时刘安是怎么想到制作现磨豆浆的呢?相传刘安是个大孝子,他的