实验背景及目的：心肌缺血/再灌注损伤(myocardium ischemia/reperfusion injury，MIRI)是急性心肌梗死患者再灌注治疗时经常伴随的重要病理生理反应，已成为阻碍心肌从再灌注治疗中获得最佳疗效的主要难题。MIRI机制复杂，目前尚缺乏有效的临床防治手段。近期研究发现，微循环障碍及血管内皮功能障碍是其重要的病理生理机制之一。Scarabelli等的报道也证实，心肌微血管内皮细胞(cardiac microvascular endothelialcell， CMECs)在MIRI中具有关键作用。去天门冬氨酸血管紧张素Ⅰ(des-aspartate-angiotensinⅠ，DAA-Ⅰ)是一种内源性的血管紧张素Ⅱ拮抗剂，以往研究表明DAA-Ⅰ可通过抑制炎症反应从而减轻MIRI，保护心脏。然而，DAA-Ⅰ对缺血/再灌注损伤(ischemia/reperfusion injury，I/RI)时心肌微血管内皮细胞是否有保护作用及其机制仍不明确。缺氧、钙离子平衡失调、自由基等均可引起内质网功能障碍,触发内质网应激(endoplasmic reticulum stress，ERS)，是缺血性心脏病的重要发病机制之一，有研究证实ERS参与了心肌I/RI时心肌细胞的凋亡。然而，ERS是否参与了I/RI诱导心肌微血管内皮细胞的损伤及凋亡，且其在DAA-Ⅰ抑制I/R诱导的CMECs损伤中发挥的作用及机制尚不明确。因此，本实验将在细胞水平建立SI/R模型，研究DAA-Ⅰ是否能够抑制I/R过程中CMECs损伤，以及ERS是否参与此过程，并进一步探讨ERS在此过程中发挥的作用及机制。实验方法：1、分离培养大鼠CMECs，建立模拟缺血/再灌注（simulated ischemia reperfusion，SI/R）模型，完全随机分组，分为对照组、模拟缺血/再灌注组（SI/R组）、模拟缺血/再灌注+DAA-Ⅰ（2.5、3.75、5.0μmol/L）组。2、MTT检测细胞增殖能力，细胞划痕实验及Transwell小室检测细胞迁移能力，caspase3酶活性检测及TUNEL法检测细胞凋亡。3、采用Western blot检测GRP78/Bip、CHOP/GADD153、cleaved caspase-12蛋白的表达；采用Real-time qPCR法检测GRP78、CHOP/GADD153在mRNA水平的表达。结果：1、分离和培养心肌微血管内皮细胞并成功建立SI/R模型。2、与对照组相比较，SI/R组CMECs增殖能力明显降低(P <0.01)，凋亡率显著上升[(24.85±0.67)%比(3.55±0.11)%，P <0.01]。与SI/R组相比，SI/R+DAA-I组细胞增殖能力明显升高(P <0.01)并呈剂量依赖性，细胞迁移率上升(P <0.01)，caspase3酶活性明显降低(P <0.01)，凋亡指数明显下降[(15.18±0.40)%比(24.85±0.67)%，P <0.01]。3、WB结果显示：与对照组相比较，SI/R组和SI/R+DAA-I组的GRP78、CHOP/GADD153、cleaved caspase-12表达明显上升(均为P<0.01)；与SI/R组相比，SI/R+DAA-I组的GRP78、CHOP/GADD153、 cleaved caspase-12表达明显降低(均为P <0.01)。Real-time qPCR结果显示：对照组与SI/R组相比较，SI/R组的GRP78mRNA、CHOP/GADD153mRNA表达均显著升高(均为P <0.01)；与SI/R组相比，SI/R+DAA-I(5.0μmol/L)组的GRP788mRNA、CHOP/GADD153mRNA表达均降低(均为P <0.01)。结论：DAA-I可显著抑制缺血/再灌注损伤诱导的CMECs凋亡，促进CMECs存活，改善细胞功能，其保护作用可能与下调ERS相关蛋白的表达有关。