乳香、党参和当归提取物对雪旺细胞增殖及相关蛋白表达的影响

来源 :东北农业大学 | 被引量 : 5次 | 上传用户:TIGERKING2009
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实验通过乳香、党参和当归提取物分别对雪旺细胞(Schwann Cells, SCs)的干预作用,检测SCs的用药安全范围、细胞生长曲线、细胞周期时相的变化、细胞上清中脑源性神经营养因子(brain derived neurotrophic factor, BDNF),神经细胞黏附分子(neural celladhesion molecule, NCAM)和增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen, PCNA)等指标,探讨中药促进创伤愈合中神经的修复作用。实验以SCs为研究对象,采用MTT比色法检测乳香提取物(ME)、党参提取物(CPE)和当归提取物(AE)对SCs的细胞毒作用和增殖范围;采用流式细胞术检测SCs细胞周期的变化和DNA含量的百分率;ELISA试剂盒检测SCs分泌脑源性神经营养因子(BDNF)、神经细胞黏附分子(NCAM)及增殖细胞核抗原(PCNA)的变化;采用荧光定量PCR法检测SCs中BDNF基因表达量的变化。实验结果表明:(1)乳香、党参及当归提取物对SCs的安全用药浓度分别是:62.5~8000mg/L、125~4000mg/L、125~2000mg/L。在三种中药成分干预SCs24h和48h后,MTT比色法检测结果显示乳香提取物浓度为125mg/L~500mg/L时与对照组相比增殖作用差异显著(P<0.05);党参提取物浓度为1000~4000mg/L时与对照组相比增殖作用差异显著(P<0.05);当归提取物浓度为500~2000mg/L时与对照组相比增殖作用差异显著(P<0.05),各中药成分干预SCs48h后对细胞增殖影响较小。(2)流式细胞仪检查结果证实,中药干预SCs24和48h,乳香提取物浓度为125、250和500mg/L时;党参提取物浓度为1000、2000和4000mg/L时;当归提取物浓度为500、1000和2000mg/L时与对照组相比DNA含量的百分率升高显著(P<0.05)。(3)ELISA检测结果显示对SCs分泌蛋白(BDNF、NCAM和PCNA)的量均有增加。(4)荧光定量PCR检测结果显示,乳香提取物药物浓度为125mg/L时SCs表达BDNF基因量增加显著;党参提取物药物浓度为2000mg/L时SCs表达BDNF基因量增加显著;当归提取物药物浓度为1000mg/L时SCs表达BDNF基因量增加显著。结论:中药提取物在适当范围内促进SCs增殖,不同浓度促增殖能力不同,其中乳香、党参和当归提取物浓度分别在125、2000和1000mg/L时效果最佳,并可使体外培养SCs的BDNF、NCAM和PCNA表达上调。
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