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背景:三阴性乳腺癌（Triple-negative breast cancer,TNBC）是一种高侵袭性乳腺癌,占乳腺癌总病例的10～15%,化疗是目前的唯一有效选择。由于缺乏明确的治疗靶点,尽管进行高强度的化疗但治疗后5年内复发率仍然较高,预后差。传统的化疗药物对人体正常细胞有非特异性毒性并且可能会导致耐药细胞的产生,TNBC亚型的提出为TNBC提供了可能的治疗靶点。到目前为止,国内外仍然缺乏针对三阴性乳腺癌明确、安全、有效的治疗方案。既往的研究发现,乳酸菌（Lactic acid bacteria,LAB）具有一定的抗肿瘤活性,在胃肠道肿瘤、黑色素瘤方面的治疗效果已被确认,且认为其与传统化疗相比更安全性、副作用更少。除此之外,已在黑色素瘤、肺癌中证明其对免疫抑制剂具有协同作用。然而,关于乳酸菌抑制三阴性乳腺癌的效果及其机制的报告较少。目的:对两株乳酸菌PL-001、PL-002的生物特性及安全性进行评估;探索其对三阴性乳腺癌抑制效果、与程序性死亡受体-1（Programmed cell death protein-1,PD-1）阻断剂PD-1单抗联合治疗的效果,探索可能的作用机制。方法:第一部分:乳酸菌生物学特性及安全性的研究:对选取的乳酸菌进行革兰氏染色观察其形态,新鲜菌液按1%、3%、5%体积分数的量接种于MRS肉汤培养基培,通过测定菌株生长液的吸光值OD600绘制生长曲线,并对其进行溶血性、耐受胆盐和胃酸能力测定、生物膜形成能力测定及耐药试验综合评估其进行体内实验的可行性。第二部分:乳酸菌抑制三阴性乳腺癌的体内实验研究:将鼠源型4T1细胞接种于6周龄BALB/c雌性小鼠第二乳垫下,构建免疫原性较差的三阴性乳腺癌模型,9天后开始治疗。将小鼠随机分为6组:（1）4T1细胞乳腺癌模型组（2）PL-001乳酸菌+模型组（3）PL-002乳酸菌+模型组（4）PD-1单抗+模型组（5）PD-1单抗+PL-001乳酸菌+模型组（6）PD-1单抗+PL-002乳酸菌+模型组。PL-001、PL-002每天予菌数为1×109CFU的200μL菌液每只小鼠灌胃治疗21天,按5mg/kg剂量每周两次腹腔注射浓度为0.5mg/ml浓度的PD-1单抗,每周两次测量肿瘤体积,称重。各组小鼠治疗21天后在二氧化碳麻醉下采用颈椎脱位法处死,取肿瘤组织、脾脏及血。第三部分:乳酸菌灌胃抑制三阴性乳腺癌机制的初探。采用流式细胞计数仪检测前三组实验小鼠肿瘤标本中T细胞、DC细胞的水平以及脾脏中的T细胞水平。应用ELISA法检测前三组小鼠血清中TH1型细胞因子IL-2和IFN-γ和TH2型细胞因子IL4、IL10表达情况。结果:1.PL-001及PL-002乳酸菌在浓度为3%～5%MRS（体积分数）肉汤培养基中生长良好,二者均不溶血且在PH3.0的胃液中存活率均＞50%,在不同浓度胆粉中均能存活且呈现较好的生长趋势。两株备选菌株具有较弱的生物膜形成能力对常见的青霉素、氯霉素等抗生素均敏感。综合以上结果,乳酸菌PL-001、PL-002都具备体内实验的可行性。2.使用PL-001、PL-002乳酸菌灌胃治疗的小鼠肿瘤体积小于模型组（P＜0.05）,与PD-1联合治疗并没有协同效果（P＞0.05）。3.流式结果显示PL-001及PL-002均能增加小鼠脾脏内CD4+T和CD8+T细胞的含量（P＜0.05）,并增加了肿瘤组织中DC细胞的含量（P＜0.05）。4.ELISA结果显示,通过乳酸菌治疗的小鼠血清中TH1型细胞因子IL-2和IFN-γ升高（P＜0.05）;TH2型细胞因子IL4、IL10降低（P＜0.05）。结论:乳酸菌PL-001、PL-002增加肿瘤内DC细胞的含量、促进脾脏T细胞的增加;增加血清中TH1型细胞因子IL-2、IFN-γ,抑制4T1肿瘤的发展。但未证实其与PD-1抗体的协同作用。本研究为三阴乳腺癌的治疗提供了一种治疗新思路,具有潜在的临床转化应用前景。