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渤海湾地区是我国苹果主产区之一,苹果轮纹病是危害该地区苹果枝干和果实的重要病害,发病率逐年增高,为深入研究该地区苹果轮纹病的症状及病菌的多样性,本研究通过对环渤海湾地区3个省、23个地市不同年份、不同时期的病害症状进行观察和描述,同时广泛采集、分离和纯化病原菌,共获得216个供试菌株,研究了菌株的培养学特征、形态学特征,分析了病菌的系统发育关系及致病性分化,主要研究结果如下:1.环渤海湾地区的苹果轮纹病症状主要表现为6种类型,主要为轮纹隆起型、干腐型、枝枯型、轮纹凹陷型、水泡型和果实轮纹腐烂型。轮纹隆起型和凹陷型是该地区苹果枝干轮纹病的主要症状类型,果实多为轮纹腐烂型。2.通过对轮纹病菌菌落的颜色、大小、气生菌丝的茂密程度、色素、边缘和背面特征的比较,环渤海湾地区的轮纹病菌主要分为五大类型;依据子实体腔室的结构,颜色,产孢细胞,孢子(分生孢子和子囊孢子)形态、颜色、大小、结构、隔膜、孢子的大小等形态学特征,环渤海湾地区苹果轮纹病菌子实体多为黑色或灰白色,表生、半埋生或埋生,单生或聚生,多为球形或扁球形,少数为圆柱形或不规侧形状,子实体可产生三种类型的孢子:分生孢子、子囊孢子和小孢子,部分菌株三种类型孢子混生。形态学鉴定为Botryosphaeria dothidea,其他菌株形态学特征差异大,尚需明确其分类地位。3.应用DnaSP4.0软件对176菌株的ITS序列单倍体型分析,供试菌株分为10个单倍体型,Hap1和Hap2为环渤海湾地区的优势菌株,而其他菌株单倍体型菌株数量较少。应用ITS、β-tubulin和EF-1α等多基因系统发育单独和联合分析,ITS序列结果表明,供试菌株主要分为两个类群,其中Hap1和Hap2的单倍体型菌株主要处于第一类群中,共114个菌株,菌株与B. dothidea的同源性很高,为优势类群;另一类群与B. dothidea同源性较低。与参比B. dothidea菌株ITS1、5.8S、ITS2三个保守区段均有不同程度的变异。β-tubulin序列也显示出两个类群,其系统关系与ITS序列结果一致。EF-1α序列分析也显示出两个类群,差异菌株的系统关系与ITS序列结果一致,而与β-tubulin序列结果部分一致。根据多基因联合系统发育分析显示, B. dothidea菌株存在明显的种内差异,从差异较大的菌株类群比较来看,可能存在不同种。4.将上述培养学、形态学以及分子系统发育表现不同类群及差异较大的菌株作为代表菌株,进行室内人工接种进行菌株致病性测定。结果显示,环渤海湾地区苹果轮纹病菌致病性存在分化,少数菌株致病性较强,大部分菌株致病性中等,少数菌株的致病性较弱。菌株致病力分化与其地理分布没有直接关系。综合以上研究结果,环渤海地区苹果轮纹病菌症状表现多样性,而病菌主要以Botryosphaeria dothidea为优势类群,种群结构单一,种内存在变异。