向日葵锈菌候选效应蛋白的鉴定

来源 :内蒙古农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:gksword
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
由向日葵柄锈菌(Puccinia helianthi)引起的向日葵锈病严重威胁及危害着向日葵的安全生产。在锈菌与寄主植物的互作过程中,效应蛋白作为锈菌分泌的重要武器调控寄主的生理过程、干扰寄主的免疫功能,最终入侵寄主组织以获得养分用来传播和繁殖。本研究基于前期实验室对向日葵柄锈菌效应蛋白的筛选,从中选取4个(P1~P4)符合效应蛋白特征较多的蛋白进行生物信息学分析,克隆目的基因,构建植物表达载体用于烟草瞬时表达,筛选可引起细胞坏死或抑制细胞坏死功能的效应子并对其进行亚细胞定位和表达特征分析。主要研究结果如下:1.候选效应蛋白的生物信息学分析:通过Signal P4.1,TMHMM S2.0,Pfam,big-PI predictor,Prot Param,SOPMA和Net Phos 3.1 Server等在线生物信息学软件分析候选效应蛋白的结构特征,发现4个候选效应蛋白均含有信号肽区域、不含跨膜结构域、核定位信号、Pfam和锚定位点等。2.候选效应蛋白诱导细胞坏死和抑制细胞坏死的鉴定:构建p GR107-目的基因带信号肽和去信号肽的表达载体,进行烟草瞬时表达,发现P1、P2、P3、P4、P1ΔSP、P2ΔSP、P3ΔSP、P4ΔSP不能诱导烟草细胞产生过敏性坏死反应。将候选效应蛋白接种烟草叶片,24h后在相同位点共表达小鼠促凋亡蛋白BAX,发现效应蛋白P2和P2ΔSP可抑制由BAX诱导的烟草叶片细胞坏死。3.效应蛋白的亚细胞定位:将效应蛋白P2构建至表达载体part-CAM-e GFP上,在本氏烟叶片上瞬时表达,结果显示,候选效应蛋白P2主要定位于细胞膜和细胞核。4.P2的表达特性分析:利用q RT-PCR对锈菌侵染向日葵过程中P2的表达量进行分析,结果显示,相比于夏孢子,P2在侵染后的24h~72h表达量均有不同程度的上调,在24h时达到最高峰,约为夏孢子阶段表达量的14倍。
其他文献
学位
高考临近,最怕作文。下笔无思路、扣题不够紧、表达不深刻、构思乏新意……纵"豆蔻词工",亦"难赋深情"。与其"临渴而掘井",不若"未雨"之时先"绸缪"。思路打不开怎么办?当此之时,宜静下心来、由点及面、合理联想:一想生活中类似的现象或事理;二想课本上所学的相关知识或道理;三想日常写作中用到的相关素材;四想多年阅读印象中的人物或情节,甚至广播、电视、音乐、旅游中听到的或见到的……发散联想,打开视
期刊
目的 探讨基于失效模型与效应分析的给药错误预警项目在护士长总值班质控中的应用效果。方法 对给药错误进行根因分析,借鉴失效模型与效应分析,形成给药错误相关护理缺陷的红色预警和黄色预警并纳入护士长总值班重点督查内容,比较实施前后预警条目触发次数,预警条目的风险系数以及给药错误不良事件的情况。结果 实施后,红黄预警触发次数显著高于实施前,5个预警条目的发生频次、3个条目探测度、7个条目风险系数显著减少(
随着GNSS的不断发展,一些新服务新需求不断涌现,导航下行链路对信息传输速率的要求越来越高,码元移位键控(Code Shift Keying,CSK)调制的提出能够在很大程度上弥补二元相移键控(binary phase shift keying,BPSK)调制存在的缺陷,同时CSK信号调整灵活,与多元低密度奇偶校验码(Non-binary Low Density Parity Check,NLDP
结核病(Tuberculosis)是一种慢性消耗性传染病,它是由结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)侵入人和动物体内引起的一种人畜共患病。结核病主要通过粪便和唾液传播。近年来在马鹿和梅花鹿中传播较广泛,鹿结核病的主要病原体为牛型结核分枝杆菌(Mycobacterium bovis)。该病的广泛传播对养鹿业的发展危害严重,为了迫切寻找一种快速诊断梅花鹿结核病的
学位
学位
学位
学位
2022年以来,疫情持续叠加地缘政治冲突,全球经济复苏减速降档,滞胀程度加深。俄乌冲突与美欧对俄制裁,对全球经济、金融、能源、粮食安全产生广泛影响。美联储收紧货币政策,将产生广泛负面溢出效应。2022年第一季度中国经济增长仍处于恢复过程,新外生因素压低增长预期;就业整体呈弱修复态势,不平衡不充分特征持续;物价分化走势有所收敛,输入性通胀压力趋增;外贸外资合作维持稳定,出口和利用外资增长再超预期;财