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目的探讨苦参碱(Matrine, Mat)诱导人肝癌Hep G2细胞发生自噬现象的分子机制。方法以人肝癌Hep G2细胞为研究对象,不同浓度苦参碱(0,0.25,0.5,1.0,2.0mg/ml)干预12h,24h,48h后,用倒置显微镜观察Hep G2细胞的形态学变化,透射电子显微镜观察细胞超微结构的变化,实时定量RT-PCR检测Beclin 1 mRNA的表达水平,Western blotting方法检测自噬相关蛋白LC3-Ⅱ,雷帕霉素靶蛋白(mTOR/p-mTOR)及其下游的核糖体蛋白质S6(p70s6k/p-p70s6k)蛋白的表达。结果0,0.25,0.5,1.0,2.0 mg/ml苦参碱作用12h,24h,48h后,以时间和剂量依赖的方式诱导人肝癌Hep G2细胞发生自噬现象。倒置相差显微镜下发现对照组(0 mg/ml苦参碱)细胞生长良好,形态正常,贴壁完整,苦参碱组细胞胞质中出现了大小不等的空泡,并不断增多、变大。1.0和2.0mg/ml的苦参碱作用12,24,48h后,培养基中出现不能贴壁的悬浮细胞,细胞变小、变圆。2.0 mg/ml的苦参碱作用48h后,整个培养基在镜下呈一片荒凉状。透射电子显微镜下进一步证实1.0mg/ml苦参碱干预24h后,与对照组(0mg/ml苦参碱)相比,苦参碱处理组细胞可见肿胀的细胞器,双层膜结构包裹的细胞质,以及明显的自噬小泡和空泡。实时定量RT-PCR和Western blotting检测显示苦参碱作用人肝癌Hep G2细胞后,以时间和剂量依赖方式上调自噬现象发生过程中必不可少的基因Beclin 1的mRNA及自噬现象发生的分子标志LC3-Ⅱ蛋白的表达。Western blotting检测同时显示苦参碱诱导人肝癌Hep G2细胞发生的自噬现象可能是通过mTOR信号通路实现。苦参碱干预24h后,mTOR及其下游p-70s6k蛋白的表达没有明显的统计学差异(p>0.05)；0,0.25,1.0,2.0mg/ml的苦参碱作用24h后,p-mTOR及p-p70s6k蛋白的表达量随着苦参碱浓度的增加而下调。结论苦参碱能够以时间和剂量依赖性的方式诱导人肝癌Hep G2细胞发生自噬现象,并且这种自噬现象的诱导可能通过下调mTOR信号通路实现。