论文部分内容阅读
目的：已有研究发现ER-a36可通过非经典的雌激素膜信号传导通路,使激素受体阳性的乳腺癌对内分泌治疗产生耐药。拉帕替尼(Lapatinib)是一种小分子表皮生长因子酪氨酸激酶抑制剂,可通过阻断下调信号抑制乳腺癌细胞增殖。本研究将探索拉帕替尼是否能通过下调ER-a36相关非经典的雌激素膜信号传导通路,逆转激素受体阳性乳腺癌细胞的他莫昔芬(tamoxifen, TAM)耐药,并初步探索其逆转耐药的分子机制,为乳腺癌内分泌治疗及靶向治疗提供新的理论支持。方法：运用MTT、AnnexinV-FITC/PI双染法流式细胞术、Western Blot等技术检测经拉帕替尼单药或加用4-羟基他莫昔芬(4-hydroxy-tamoxifen,4OHT)处理后乳腺癌细胞株的增殖情况及相关蛋白水平的变化。结果：1、MTT检测可发现拉帕替尼对ER阳性乳腺癌细胞存在明显抑制作用,在MCF-7、MCF-7/ER-a36两细胞系中,存在剂量依赖效应；2、AnnexinV-FITC/PI双染法流式细胞仪检测发现拉帕替尼可显著增强40HT诱导激素受体阳性、ER-a36过表达的乳腺癌细胞凋亡(P<0.001)；3、拉帕替尼预处理或与40HT联合作用均可加强凋亡起始、执行阶段关键Caspase家族蛋白剪切活化、抑制抗凋亡Bcl-2蛋白表达,下调细胞周期正性调控蛋白Cyclin D1、Cyclin D3、CDK2、CDK4等的表达；4、拉帕替尼显著抑制ER-a36相关非经典的雌激素膜信号传导通路中AktT308位点及S6K1蛋白的磷酸化活化,发挥增敏、部分逆转MCF-7/ER-a36对40HT耐药的作用。结论：拉帕替尼可逆转ER阳性、ER-a36过表达的乳腺癌细胞对他莫昔芬的耐药,其主要通过(1)诱导细胞周期停滞与凋亡,(2)抑制ER-a36相关的非经典的Akt-mTOR信号传导通路过度活化,发挥逆转他莫昔芬耐药作用。拉帕替尼可能成为激素受体阳性、ER-a36过表达的他莫昔芬耐药乳腺癌治疗的新靶点。