Yes相关蛋白在慢性鼻-鼻窦炎中的表达及意义

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目的:研究YAP蛋白在慢性鼻-鼻窦炎伴鼻息肉(chronic rhinosinusitis with nasal polyps CRSwNP)、慢性鼻-鼻窦炎不伴鼻息肉(chronic rhinosinusitis without nasal polyps CRSsNP)和正常鼻黏膜组织中的表达,以及在CRSwNP和CRSsNP组织中YAP蛋白细胞核/质表达的联系,分析其在慢性鼻-鼻窦炎的发生及进展中的相关机制,为慢性鼻-鼻窦炎疾病的发生机制奠定科学实验基础,旨在以YAP为治疗靶点来治疗慢性鼻-鼻窦炎,为临床治疗提供新的可能。方法:1.选取2018年12月至2019年9月间,于山西医科大学第一医院耳鼻咽喉头颈外科住院的慢性鼻-鼻窦炎伴(不伴)鼻息肉患者,并于鼻内镜下行功能性鼻内镜术,术中取慢性鼻-鼻窦炎伴鼻息肉患者的清洁的鼻息肉最头端组织40例作为实验组A组,钩突黏膜组织40例作为实验B组;对照组为同期收集20例在功能性鼻内镜下,鼻中隔偏曲矫正术患者的下鼻甲头端黏膜组织标本。2.实验方法采取免疫组化SP法,测定鼻息肉组织、钩突炎性黏膜组织及正常鼻黏膜组织中YAP蛋白的表达情况。3.YAP蛋白的表达情况,根据每个样本的染色强度以及阳性细胞的数量进行评定。细胞核和(或)细胞质染色显示为清晰黄色至棕色的特异性免疫反应颗粒的结果样本判定为阳性结果。选取5个以上高倍视野(400×),观察每张切片的染色强度和面积,通过半定量积分法进行判断。根据染色强度分为4个等级:无色或无明显染色为阴性染色即(-),为0分;浅黄色为弱阳性即(+),为1分;浅黄色至黄色中等阳性(++),为2分;黄色至棕黄色为强阳性即(+++),为3分。着色细胞数≤10%为0分、11%~25%为1分,26%~50%为2分、51%~75%为3分、76%~100%为4分;最后计算每张切片的得分情况,根据每张切片的平均着色度分值乘以平均着色细胞所占的百分率分值,结果为最后的得分:0~2分为(-),3~4分为(+),5~6分为(++),7分为(+++)。4.所得数据使用SPSS 21.0软件进行统计分析。结果:1.CRSwNP、CRSsNP和正常鼻黏膜组织中YAP蛋白在细胞质中表达情况均有不同,表达的结果根据染色标准分为阴性、弱阳性、阳性、强阳性。YAP蛋白在CRSwNP组织中的表达,4组结果分别有16、9、9、6例;YAP蛋白在CRSsNP组织中的表达,4组结果分别有17、11、7、5例;YAP蛋白在正常鼻黏膜组织中的表达,4组结果分别有14、4、2、0例;2.CRSwNP、CRSsNP和正常鼻黏膜组织中YAP蛋白在细胞核中表达情况均有不同,表达的结果根据染色标准分为阴性、弱阳性、阳性、强阳性。YAP蛋白在CRSwNP组织中的表达,4组结果分别有17、11、7、5例;YAP蛋白在CRSsNP组织中的表达,4组结果分别有18、12、6、4例;YAP蛋白在正常鼻黏膜组织中的表达,4组结果分别有15、4、1、0例;3.YAP蛋白的细胞质阳性表达和细胞核阳性表达具有相关性(p﹤0.05),且呈正相关。结论:YAP蛋白在慢性鼻-鼻窦炎组织中的表达明显高于正常鼻粘膜组织,相反,正常的鼻黏膜组织标本中染色发现,其上皮细胞以及腺上皮细胞中未见明显YAP蛋白在细胞质与核中的表达。CRSwNP鼻息肉组织中YAP蛋白的表达与CRSsNP中炎性粘膜组织中YAP的表达差异无统计学意义,这可能是因为在CRS的发生发展中,YAP不但参与持续性炎症的发展,同时也会通过促进EMT及激活上皮干细胞来促进组织重塑。细胞核和细胞质中的YAP蛋白表达呈阳性结果,二者具有正相关性,YAP蛋白在细胞质中逐渐聚集,其过度聚集能够引起YAP自身向细胞核转移,进入细胞核后的YAP能够激活转录因子并使之激活,从而产生一系列促增殖效应。YAP参与了慢性鼻-鼻窦炎的形成机制,通过促进慢性炎症的发展以及调控细胞增殖导致组织重塑。
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