鳖甲抗肝纤维化的药效物质及作用机理研究

来源 :湖北中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:liqund7h
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
鳖甲为药食两用传统中药,来源于鳖科动物鳖(Trionyx sinensisWiegmann)的背甲,具有滋阴潜阳,软坚散结,退热除蒸的功效;主治阴虚发热,癥瘕,虚风内动等病症。现代药理学研究表明,鳖甲提取物显示了较强的抗肝纤维化作用;据文献报道,以鳖甲为君药的复方制剂治疗肝纤维化疾患,临床疗效良好。   为了诠释鳖甲抗肝纤维化的物质基础,本论文在中医药理论指导下,通过多学科交叉的研究方法,采用超声提取方法和膜透析分离技术将鳖甲提取物分为不同分子量范围的物质部位,通过其对肝星状细胞增殖的影响及其对肝星状细胞活化、胶原合成的影响等活性筛选方法,确定了分子量小于6000的鳖甲提取物为抗肝纤维化有效物质部位。采用现代色谱分离技术,通过葡聚糖凝胶Sephadex G-25将鳖甲有效物质部位分离为8个分子量段的肽类物质组分(Bj1-Bj8),药理筛选得到3个分子量段肽类物质组分具有抗肝纤维化活性(Bj4、Bj6、Bj7);选择活性较强的Bj6分子量段进一步通过葡聚糖凝胶Sephadex G-15将Bj6分离为16个肽类物质小组分,结合四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT比色法)和酶联免疫吸附剂测定(ELISA)活性筛选,确定了3个活性较强的肽类物质小组分(Bj6-11、Bj6-12、Bj6-13);采用制备高效液相色谱分离方法,从这三个活性较强的肽类物质小组分中分离得到9个肽类成分,药理筛选表明成分2和成分4具有较强抗肝纤维化作用。   采用4700串联飞行时间质谱仪[4700 Proteomics Analyzer(TOF/TOFTM)(Applied Biosystems,USA)],对两种肽类成分进行结构分析,测定结果为:①成分2:分子量为1040.57,氨基酸排序为W L Y P GN T S C(Trp-Leu-Try-Pro-Glv-Asn-Thr-Ser-Cys);②成分4:分子量为583.299,氨基酸排序为Y S G A W(Try-Ser-Gly-Ala-Trp);经NCBI检索,以上两个肽类化合物均为首次从天然界中分离得到。   通过免疫印迹法(Western-blot),从上述抗肝纤维化肽类物质中选择活性较好的化合物“Y S G A W”进行了抗肝纤维化作用机理研究。研究结果表明,该肽类是通过减少Smad3蛋白的磷酸化,减少细胞外基质(ECM)等基因的转录;同时,通过增强基质金属蛋白酶-1(MMP-1)的活性和降低金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)的活性,使降解的ECM增多,从而达到抗肝纤维化的目的。
其他文献
在同一环境下开展伊拉配套系父母代种兔与伊拉商品代兔中选留母兔的性能测定工作,随机选取伊拉配套系父母代种兔和商品代母兔各65只,开展连续3个胎次的繁殖性能和生产性能测
结合天津市医药科学研究所动物实验室的实际,讨论实验动物设施内实验用兔的饲养管理,加强和完善兔的管理制度.参照国家有关实验动物标准,建立一套行之有效的实验室管理规范,
兔业是草食畜牧业的重要组成部分,也是助力国家贫困地区脱贫的扶贫产业之一.新冠肺炎暴发后,兔产业经济也受到影响,出现饲料供应不足、产品积压滞销等问题,所以,在做好新冠疫
对于中央电视台来说,时政报道集资源优势、播出优势于一身,具有较强的影响力和较高的关注度。但由于这一领域的报道形态并未被充分开拓,所以无论是在内容上还是在形式上,创新
本刊讯2014年4月23日,中国石油书法家协会第六次会员代表大会在北京召开,中国文联党组成员、书记处书记罗成琰,中国书协分党组书记、秘书长陈洪武,中国石油文联主席陈明,中国文联
医务部作为医院重要的行政管理部门,在面临大型突发传染性疾病疫情的情况下,需快速响应、落实医院防控措施,同时保障院内医疗安全,在医院的传染病综合防控中发挥重要作用.本
目的:芹菜素(apigenin,API)属于黄酮类。具有抑制致癌物质的致癌活性,芹菜素主要存在于瑞香科、马鞭草科、卷柏科植物中,如芫花,卷柏中含量较大。与其他黄酮类物质(槲皮素、山奈黄酮)相比具有低毒、无诱变性等特点。结肠癌(cancer of colon)是西欧、北美等发达国家最常见的恶性肿瘤,也是我国九大常见恶性肿瘤之一。在我国,因结肠癌死亡者,男性居恶性肿瘤死亡的第5位,女性居第6位。至今5
  目的:①明确中药药浴治疗风热型小儿外感发热的疗效。②为临床上开展药浴疗法提供依据。   方法:收集符合入组标准的风热型小儿外感发热患者 132 例,随机分为对照组和药浴
陈旭光教授在国内率先提出了亚洲电影新力量新美学的问题,值得学界一起讨论。略知得到韩国电影者的认同,在亚洲电影新版图中,韩国电影工业的分量、作品的风格、美学特征都独树一帜。  韩国电影自20世纪90年代末在世界影坛开始显山露水,一批电影摘取国际A类电影节大奖桂冠,以林权泽、李沧东、金基德、朴赞郁、奉俊吴、洪尚秀等为代表的一批资深导演,他们作品独特的美学风格和电影表现手法得到世界性认可。在21世纪初,
期刊
具体详情:http://www.foto-video.cn/forum/viewtopic.php?t=250382009年6月27日,《数码摄影》“户外摄影?绿镜头沙龙”在炎炎夏日的下午于北京佳能活动空间成功举行,戈壁、