四个蝴蝶兰品种组培后代的RAPD分子检测及变异分析

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蝴蝶兰(Phalaenopsisamabilis)又称蝶兰,兰科蝴蝶兰属,因花瓣似蝴蝶而得名,素有“兰中皇后”之美誉。本论文主要应用RAPD标记技术对4个蝴蝶兰品种组培苗后代:绿熊蝴蝶兰、内山姑娘蝴蝶兰、富贵龙蝴蝶兰、光芒四射蝴蝶兰共126个株系进行了变异研究,主要结果如下:  1、探索出针对蝴蝶兰的有效的RAPD-PCR反应体系。本论文通过调试RAPD反应的诸多因子,如dNTPs、模板DNA、引物、TaqDNApolymerase严格控制反应条件及反应用量,分别为:2μl、1μl、1μl、0.2μl。获得了重复性好,结果稳定的有效的RAPD反应体系。  2、应用RAPD技术对组培4个蝴蝶兰品种内个、体的亲缘关系进行了聚类分析,同时进行了分子检测,并检测出了变异株系。扩增条带多态性百分比较低,存在共有的谱带,大多保持一致性,对相似系数进行了系统的统计,绿熊蝴蝶兰、内山姑娘蝴蝶兰、富贵龙蝴蝶兰、光芒四射蝴蝶兰半均相似系数分别为0.941、0.933、0.913、0.942。绿熊蝴蝶兰、内山姑娘蝴蝶兰、富贵龙蝴蝶兰、光芒四射蝴蝶兰平均变异率分别是:10.420、9.732、5.908、10.000,同时鉴定找出了四个蝴蝶兰品种内的可能变异株系。  3、针对变异株系进行了形态观察。绿熊蝴蝶兰14、15、16和30号株系出现较大变异。内山姑娘蝴蝶兰3、9、10、12和13号株系分子检测为变异株系,但3、9和10株型较正常株没出现较大差异。富贵龙蝴蝶兰组培后代RAPD聚类分析检测发现:18、19、21、22、24和25号株系较亲本有较大变异。光芒四射蝴蝶兰组培后代RAFO聚类分析检测发现:7、17和19号株系可能出现变异。
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