注射用银杏二萜内酯由江苏康缘药业股份有限公司已上市生产的银杏二萜内酯葡胺注射液改剂型而成,其主要成分是银杏内酯A,B,C,K,具有抗血小板聚集、对缺血损伤的保护、抗动脉粥样硬化等药理作用,临床主要用于脑梗死的治疗。注射用银杏二萜内酯采用冷冻干燥工艺,整个冷冻干燥过程都是在低温和真空条件下进行的,避免加热使药物产生变化,产品具有稳定的骨架、复溶性好、含水量比较低、稳定性好,具有便于储存及运输的特点。一、注射用银杏二萜内酯制剂处方筛选及冷冻干燥工艺研究1.注射用银杏二萜内酯制剂处方筛选以制剂的外观、复溶性、澄明度为评价指标对注射用银杏二萜内酯的支架剂种类和用量进行筛选,最终确定每瓶含有银杏二萜内酯25mg、甘露醇125mg为最佳处方。同时考察了 pH值对银杏二萜内酯水溶液稳定性的影响,结果表明,pH值在8.0～9.0时溶液澄明度较好。2.注射用银杏二萜内酯除菌工艺研究以银杏内酯A、B、C、K成分的变化为指标,采用活性炭工艺和微滤工艺对注射用银杏二萜内酯注射液进行除菌研究。首先采用正交试验考察了活性炭用量、吸附时间、搅拌速度和溶液温度,实验结果表明,活性炭用量和吸附时间对银杏内酯含量有重要影响,以0.2%活性炭用量,25℃搅拌20分钟。按上述确定的最佳处方配制溶液,采用活性炭和0.22μm微孔滤膜联用的除菌工艺,以银杏内酯的含量、热源、细菌内毒素为评价指标,平行进行3组试验。结果表明:活性炭和0.22μm微孔滤膜联用的除菌工艺可以达到控制注射用银杏二萜内酯热原和细菌内毒素的要求,同时银杏二萜内酯总含量的转移率能达到94%。3.注射用银杏二萜内酯冷冻干燥工艺的研究对冷冻干燥工艺的关键参数:最低共熔点、预冻温度、预冻时间、预冻速率、升华干燥温度、升华干燥时间、解析干燥温度、解析干燥时间进行了系统的考察,最终确定其冷冻干燥工艺为:预冻温度-40℃,预冻时间4小时;升华干燥温度-10℃,升华干燥时间16小时;解析干燥温度20℃,解析干燥时间8小时。4.注射用银杏二萜内酯溶液配伍相容性和中试放大研究对注射用银杏二萜内酯进行了溶液配伍相容性研究,结果表明:注射用银杏二萜内酯与0.9%的氯化钠注射液、5%葡萄糖注射液在8小时内配伍稳定。对注射用银杏二萜内酯进行了三批中试放大,结果表明:注射用银杏二萜内酯处方和冷冻干燥工艺参数稳定,产品合格率、质量指标均符合要求。二、注射用银杏二萜内酯质量标准研究按照《中国药典》2010版一部附录Ⅰ U注射剂项下的要求并结合具体品种,从外观性状、可见异物、不溶性微粒、有关物质、无菌、热原、细菌内毒素、含量测定、指纹图谱等方面制定了注射用银杏二萜内酯质量标准,从而为产品的安全性和质量可控提供了保证。三、注射用银杏二萜内酯初步稳定性研究1.影响因素试验将注射用银杏二萜内酯分别在高温60℃、高湿(RH=92.5±5%)、光照强度4500±500Lx条件下放置10天,分别于0天、5天、10天取样,考察外观性状、可见异物、不溶性微粒、有关物质、热原、含量、指纹图谱,结果表明:各指标均无明显变化。2.加速稳定性试验将注射用银杏二萜内酯分别在40℃(RH=92.5±5%)条件下放置6个月,分别于0月、1月、2月、3月、6月取样,考察外观性状、可见异物、不溶性微粒、有关物质、热原、含量、指纹图谱,结果表明:各指标均无明显变化。3.长期稳定性试验将注射用银杏二萜内酯分别在25℃(RH=60±10%)条件下放置12个月,分别于0月、3月、6月、9月、12月取样,考察外观性状、可见异物、不溶性微粒、有关物质、热原、含量、指纹图谱,结果表明:各指标均无明显变化。四、注射用银杏二萜内酯初步安全性研究对注射用银杏二萜内酯进行了溶血性试验、肌肉刺激性试验、血管刺激性试验、主动全身过敏性试验、被动皮肤过敏性试验等安全性检查。结果表明:注射用银杏二萜内酯对家兔红细胞无溶血作用;对耳缘静脉无明显刺激作用,对大鼠股四头肌无明显刺激作用,对豚鼠无致敏作用,同时热原检查结果也表明,家兔体温未有升高。五、注射用银杏二萜内酯晶型的初步研究对注射用银杏二萜内酯经不同冷冻干燥工艺和不同处方成分冷冻干燥的样品进行X-粉末衍射试验,实验结果表明:冷冻干燥过程中预冻温度对注射用银杏二萜内酯中内容物的晶型形成起着主要的作用,注射用银杏二萜内酯中的晶型主要是甘露醇和葡甲胺共同在冷冻干燥过程形成的晶型。