论文部分内容阅读
本研究以海芋(Alocasia macrorrhiza)的种子、芽和花序为外植体,研究不同因素对海芋离体培养的影响,建立高效离体再生体系;以海芋的根状茎和花序为外植体,进行愈伤组织诱导和植株再生的初探;以海芋试管苗为材料,研究了生根条件、pH值和营养液浓度等对海芋水培的影响,并测定了不同pH值和不同浓度营养液下海芋水培苗的叶绿素含量、保护酶活性、丙二醛含量等生理指标的变化。主要研究结果如下:1.海芋离体再生体系的建立以海芋的种子、芽和花序为材料,建立了离体再生体系,并分别研究了不同因素对试管苗增殖、壮苗生根和移栽的影响。结果表明:增殖的最佳培养基为MS+6-BA 6mg·L-1+KT 1.5 mg·L-1+IBA 0.1 mg·L-1 ,增殖系数达到6.0以上,不同激素种类对试管苗增殖的影响依次为:6-BA>KT>IBA>NAA;增殖的最适白糖和琼脂浓度分别为30g·L-1和5 g·L-1;不同光质对增殖的影响依次为红光>绿光>蓝光>白光,对不同光质下试管苗的叶绿素含量及酶活性进行了测定,发现白光下叶绿素含量最低,而POD、SOD和CAT活性最高,为增殖提供相关生理依据;不同光照强度对增殖的影响,结果表明1500 Lx的光照强度最适于增殖。壮苗生根的最佳培养基为1/2MS+1.0 g·L-1AC+2.0mg·L-1PP333,壮苗率达到82.50%。移栽的最佳基质为草炭土:蛭石为3:1,移栽成活率达到93%。2.海芋愈伤组织的诱导及植株再生以海芋的根状茎和花序为外植体,进行愈伤组织诱导和植株再生的初探。以根状茎为材料,研究不同浓度及组合的2,4-D和KT对愈伤组织诱导的影响,结果表明:最适于根状茎愈伤组织诱导的2,4-D和KT浓度均为0.5 mg·L-1,2,4-D对愈伤组织诱导的影响大于KT,最佳愈伤组织诱导培养基为MS+2,4-D 0.5 mg·L-1+KT0.5 mg·L-1,愈伤组织诱导率平均达到81.67%。以海芋的幼嫩花序为材料,研究不同浓度6-BA和NAA及不同光照条件对愈伤组织诱导的影响,结果表明:6-BA的浓度过高过低均不利于花序愈伤组织的诱导,以4 mg·L-1为宜。与黑暗条件相比,弱光更有利于促进花序愈伤组织的形成。海芋根状茎愈伤组织转接后,组织褐化。一段时间后,在褐化的愈伤组织上又可以长出新的愈伤,且可以在MS+6-BA 6 mg·L-1+KT 1.5 mg·L-1+IBA 0.1 mg·L-1的培养基上分化出芽点。海芋的花序在形成愈伤组织的同时伴随着芽的发生。花序愈伤组织在诱导培养基上随着培养时间的延长可以直接再生成完整植株。3.海芋试管苗水培条件的研究以海芋试管苗为材料,研究适于其水培生根的生根剂种类和浓度、适宜的营养液酸碱度及浓度。结果表明:综合考虑生根率、根数、根长和根粗4项指标,以1 mg·L-1 IBA的生根效果最佳;综合考虑新根发生株数、新根数和新叶数3项指标及植株的腐烂情况,海芋试管苗水培适宜的pH值在6.0-6.5之间;综合考虑不同浓度的营养液水培30 d后海芋试管苗株高、茎粗、叶长、叶宽和叶片数的增幅,以1/2营养液浓度为最佳,1/4营养液浓度的水培效果次之。4.海芋试管苗水培生理变化的研究以海芋水培苗为材料,研究不同pH值和不同浓度营养液对其生理指标的影响。结果表明:pH为6.0时,海芋水培植株的叶绿素含量、POD、SOD、CAT活性均达到最高,MDA含量最低;营养液浓度为1/2 Hoagland时,植株的叶绿素含量、POD、SOD、CAT活性均达到最高,MDA含量最低。与清水对照、1/4和全量Hoagland营养液之间有显著性差异。综合考虑生理变化和形态反应,适宜海芋水培的pH值为6.0,营养液浓度为1/2 Hoagland。总之,本研究建立了海芋的高效离体再生体系;采用海芋的根状茎诱导出愈伤组织并分化出芽点,用花序诱导愈伤组织并获得再生植株;建立了海芋的水培技术体系,对海芋的离体培养和水培生产具有重要意义。