微循环是机体细胞与血液、组织间液之间进行物质、能量及信息传递的重要场所，微循环的功能、形态和代谢的完整，是维持人体器官正常功能的重要条件。微循环是疾病损伤的敏感部位，微循环障碍时组织细胞供血供氧不足引发器官功能紊乱，是高血压、脑出血、肝炎、肿瘤、糖尿病等许多疾病的重要发病环节，而持续存在的微循环障碍更加重了疾病的发展及预后。内皮细胞是构成微循环血管内膜的主要成分，可合成与分泌内皮依赖性舒张因子、内皮依赖性超极化因子、内皮素等一系列血管活性物质调节血管紧张度，已被人们看成一种特殊的内分泌器官，对于维持内环境稳定和生命活动的正常进行，具有十分重要的意义。微循环障碍时，内皮细胞被损伤，其结构和功能发生明显改变；而在某些疾病情况下血栓素A₂、白三烯等刺激内皮细胞产生缩血管活性物质收缩微血管，为微循环障碍重要病因之一；可见，微循环障碍与血管内皮关系密切。目前认为理想的治疗微循环障碍的策略是以内皮细胞特异性蛋白为药物作用靶点，通过纠正内皮细胞自身功能紊乱，产生内皮细胞保护作用。 山莨菪碱（Anisodamine,Ani）作为治疗微循环障碍的基本药物，近年来在临床被广泛使用，如用于治疗消化性溃疡、急性高原肺水肿、偏头痛、结核性渗出性胸膜炎、糖尿病等。其改善微循环作用的关键机制之一为扩张血管以对抗儿茶酚胺类引起的血管痉挛。山莨菪碱的扩血管作用机制一直不清楚，既往研究认为与其拮抗血管平滑肌M受体或α受体相关；亦有研究发现山莨菪碱有钙拮抗作用。虽然论点诸多，但山莨菪碱扩血管作用的确切机制尚未获公认，仍有待研究。既往尚未有研究报道山茛菪碱扩血管作用与血管内皮相关，本实验研究山莨菪碱是否通过内皮因素扩张血管，以及通过内皮细胞释放何种活性物质扩张血管。探索山莨菪碱扩张血管作用是否与内皮有关，将为开发以血管内皮为靶标的药物改善微循环障碍提供新的思路，对于治疗上述相关疾病具有重要意义。 本研究内容包括三部分，现概述如下： 南京区科人学硕十学位论文 1．山竞若碱对高分子右旋糖配所致微循环障碍的作用 研究山蓑营碱对高分子右旋糖配（high molecular dextran，HMD）所致大鼠肠系膜微循环障碍的改善作用。将大鼠肠系膜置于微循环显微镜下，通过微循环显微电视放大系统选取管径30一5 U m 的微动、静脉进行观察并录像。用计算机微循环图像处理系统处理，用飞点法测定其红细胞流速代表血流速度，用管径剪切法结合图象冻结法测量血管直径。记录正常值后股静脉注射 10％6b HMD，观测 1、3、7min时 HMD造成 6j微循环障碍现象。记录静注山莫营碱（给药组）或生理盐水（对照组）后 1、3、5、10、20、30、60、90、120min时肠系膜 微动。静脉管径、流态及血流速度的变化。结果发现：各组静注高分子右旋糖肝7分钟时，大鼠肠系膜微血管出现典型微循环障碍现象：管径增粗，血流缓慢甚至倒流和停流，血细胞聚集成团。山莫营碱组在给药后 口 分钟内管径趋于正常，血细胞聚集现象消失，微动静脉流速加快，与对照组相比有显著性差异。结果提示山莫营碱有改善高分子右旋糖酥所致微循环障碍的作用。11．山蓖菩碱舒张大鼠肠系膜血管床的作用及其机制 研究山莫营碱对去甲肾上腺素（Norepinephrine，NE）预收缩大鼠离体肠系膜血管床的作用与血管内皮的关系及可能机制。取大鼠肠系膜血管床以 KYbs液恒速灌注 1．5 h，以压力换能器连于四道生理i己录仪描记正常压力曲线。山莫营碱对照组和其他3组（分别以咧咪美辛、左旋硝基精氨酸甲酯、格列本脉孵育 lh）以 3 11 mol·L“NE收缩血管床，将达到的最大收缩计为 100％。i己录 1，10llmol·L”‘山莫营碱使血管床舒张的百分率；以此作为内皮充整组；再以 50 mg·L’的皂菩灌流 10 min去除血管内皮（F？．lp mol·L－’ACh检验 2 ；k证实去内皮完全），记录山莫营碱舒张NE预收缩血管床的百分率作为去内皮组。计算在正常情况下和用左旋硝基精氨酸甲酯（NG呗itr小L亿rginine methylester，LNAME）、咧噪美辛和格列本脉处理后山复营碱引起去内皮前后i预收缩血管床的舒张百分率。结果显示：山蓖营碱可引起NE预收缩血管床扩张，去除血管内皮或以 lpmol·L“‘的ql咪美辛、100Umol·厂‘的卜＊＊＊E、Iv mol·厂’的格列苯脉预处理后其扩血管作用均显著减弱。结果提示山莫营碱的扩血管作用依赖于血管内皮，与内 4 南京医科人学硕十学位论文皮细胞释放的＊＊y、前列腺素和内皮上的＊灯，有关。Ill．山蓖菩碱对培养组织和细胞NO释放的影响 利用体外培养大鼠主动脉碎片和人脐静脉内皮细胞；研究山莫营碱对其NO释放量6b影响。 1．取大鼠主动脉约Zcm称重后制备成约0．smm厚的薄片，分别置于含不同浓度 Am的克