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生长激素释放激素(growth hormone-releasing hormone,GHRH)能够促进动物生长,提高动物生产性能。注射剂量和注射方式不同,对动物生长、血液激素水平及相关基因表达有不同的影响。本实验选取不同剂量的hGHRH(1-29)NH2采用腹腔注射,以昆明小白鼠为研究对象,探讨了高剂量hGHRH(1-29)NH2对小鼠生长的影响,分析了高剂量hGHRH(1-29)NH2对小鼠生长调控的机理。 1.GHRH对小鼠生长的影响。选择GHRH注射剂量为0.25ng/g body weight、2.5ng/gbody weight、12.5ng/g body weight和25ng/g body weight。采用腹腔注射每天注射3次,连续注射9天,9天后每隔2天注射一天(3次/天),于注射后0、5、15、20、25、30天称重记录。结果表明,与对照组相比,10天内各处理组之间体重没有明显增加(P>0.05);第15天时,注射2.5ng/g body weight GHRH组体重比对照组明显增加(P<0.05);第25天时,2.5ng/g body weight GHRH、12.5ng/g body weight GHRH组体重比对照组明显增加(P<0.05),到30天时,各处理组之间体重没有明显差异(P>0.05)。0.25ng/g body weightGHRH和25ng/g body weight GHRH组小鼠30天内体重与对照组相比没有明显差异(P=>0.05)。 2.GHRH对小鼠血液GH、IGF-I、SS及生长轴相关基因的影响。依据小鼠增重结果,选取了0.25ng/g body weight GHRH、2.5ng/g body weight GHRH和25ng/g body weightGHRH三个剂量,采用腹腔注射,每隔8h注射一次,连续注射9次(72h)于注射最后一个时间点后60min,采集血液及组织。检测血清中GH、IGF-I及SS的浓度,用RT-PCR法检测GHRHR、GH、mPit1、SSTRs、SS等相关基因的表达。应用H.E.染色法检测了垂体发育情况。结果表明,2.5ng/g body weight GHRH能上调GHRHR、Pit1、GH、IGF-I、SSTR2/5及SS基因的表达(P<0.05),促进GH、IGF-I的的释放,而高剂量25ng/g bodyweight GHRH引起SS的分泌(P<0.05),以及促进SS、SSTR2、SSTR5基因的表达(P<0.05)。实验组0.25、2.5和25ng/g body weight GHRH组嗜酸性和GH阳性细胞百分率与对照组(38%)相比,随注射剂量的提高红色染色区域所占面积比例也依次增大,百分比分别为39%、54%、60%(P=0.980,P=0.139,P=0.046)。 本研究表明,高剂量的GHRH不能进一步促进小鼠体重增加的原因,可能是上调SS、SSTR2、SSTR5基因表达,使它对GH的分泌抑制作用加强,且与垂体的GHRHR表达下降等分子事件有关。该结果为进一步了解GHRH调控的分子机制提供了新的资料。