藏药牙膏制备工艺及抑菌抗炎功效研究

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目的:将诃子、结血蒿、白矾、寒水石四味藏药处方与牙膏体系结合制备具有抗炎抑菌止血作用的功效型牙膏,优选确定其最佳配方工艺,并对其抗炎抑菌作用进行功效初步研究,验证其抗炎抑菌功效,使其达到清洁口腔同时具有辅助预防牙龈炎、牙周炎等口腔疾病的口腔保健作用。方法:首先对于所添加的植物性功效成分藏药诃子、结血蒿,选择合理有效的提取工艺。诃子以浸膏得率和鞣质含量为指标,结血蒿以浸膏得率和出油率为指标,通过单因素考察和正交设计实验确定诃子、结血蒿最佳提取工艺。再筛选牙膏基质,以磨擦剂、增稠剂、保湿剂、水的用量这四个影响牙膏成型的主要因素进行配方设计,以感官性状为指标确定藏药牙膏成型工艺配方。对确定的最优配方藏药牙膏,采用二甲苯致小鼠耳肿胀模型,以肿胀度为考察指标进行藏药牙膏抗炎作用初步评价。采用微量板液体稀释法,测定藏药牙膏与结血蒿挥发油对变形链球菌(ATCC25175)、口腔变形链球菌(ATCC 15909)、嗜酸乳杆菌(ATCC4356)、粘性放线菌(ATCC 15987)、金黄色葡萄糖球菌这五种主要口腔致病菌的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC),对其抑菌作用进行初步评价。最终建立藏药牙膏中没食子酸含量测定的高效液相色谱方法,测定藏药牙膏中主要活性成分的含量,建立藏药牙膏中没食子酸含量的最低含量限定指标。结果:单因素考察和正交设计试验确定诃子最佳提取工艺条件为称取诃子药材加入8倍量的30%乙醇溶液,浸泡0.5小时,回流提取两次,每次0.5小时。结血蓠最佳提取工艺条件为称取结血蒿药材加入18倍水,浸泡1小时,提取5小时。二氧化硅藏药牙膏最佳配方工艺为最佳配方为藏药3.3g、甘油25 g、70%山梨醇40 g、二氧化硅22g、非离子瓜尔胶0.7 g、薄荷油1g、十二烷基硫酸钠(K12)2.2g、尼泊金乙酯0.1g、尼泊金丙酯0.05g、糖精0.35 g、水适量。磷酸氢钙藏药牙膏最佳配方工艺为藏药3.3g、甘油10 g、70%山梨醇16 g、磷酸氢钙52g、非离子瓜尔胶0.6 g、羧甲基纤维素钠(CMC-Na)0.4 g、薄荷油1 g、十二烷基硫酸钠(K12)2.4 g、尼泊金乙酯0.1g、尼泊金丙酯0.05 g、糖精0.35g、水适量。藏药牙膏抗炎作用初步评价结果显示藏药牙膏组对二甲苯致小鼠耳肿胀有显著的抑制作用(P<0.01)。抑菌作用初步评价结果显示在对高压蒸汽灭菌后的藏药牙膏进行抑菌效果试验,所添加的藏药浸膏浓度范围内该藏药牙膏无抑菌效果,但考虑到高压蒸汽灭菌对结血蒿挥发油的破坏,故对结血蒿挥发油的抑菌作用进行单独研究,结果显示结血蒿挥发油对5种实验细菌均有良好的抗菌活性,对口腔变形链球菌的MBC为0.734 mg·ml-1,对粘性放线菌的MBC为0.734 mg·ml-1,对变形链球菌的MBC为0.092 mg·ml-1,对嗜酸乳杆菌的MBC为0.0223mg·ml-1对金黄色葡萄球菌的MBC为2.938 mg·ml-1。该藏药牙膏中所含的结血蒿挥发油含量已达到最小抑菌浓度,表明该藏药牙膏具有良好的抑菌效果,结血蒿挥发油为其主要的抑菌作用有效成分。高效液相色谱法测定牙膏中没食子酸含量研究显示采用甲醇-含0.1%三乙胺的0.1%磷酸溶液作为流动相,进行梯度洗脱,能使没食子酸峰达到基线分离,测定藏药牙膏中没食子酸平均含量达0.802 mg·g-’。结论:通过对藏药牙膏的配方工艺研究和抗炎抑菌功效初步评价研究发现,该藏药处方与牙膏基质配伍稳定,制备所得的藏药牙膏膏体细腻光亮,气味清凉,粘稠度适中,且具有良好的抗炎和抑菌效果,具有广阔的市场前景。
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