克百威是一种高效农药,毒性强,对多种害虫具有有效的杀灭作用,在棉花、糖料、大豆等农作物的病虫害防治中有着广泛的应用。由于克百威毒性较强,可能引起人体头晕、头痛、神经损伤等一系列危害,现已被多个国家和地区禁止使用。克百威在环境中会部分转化为3-羟基克百威,因此,对克百威的残留检测应同时考虑对3-羟基克百威的检测。本研究基于新的克百威半抗原,制备了同时针对克百威和3-羟基克百威的广谱性单克隆抗体。依据免疫检测原理,分别开发了三种不同的针对于克百威和3-羟基克百威免疫检测技术。并针对不同应用场景进行检测方法优化、满足不同检测需求。采用蔬菜、水果、水体等样品进行实际样品检测与方法评价,实现对克百威和3-羟基克百威的同时快速检测。主要研究结果如下:（1）化学合成一种新的克百威半抗原,并制备了针对克百威和3-羟基克百威的广谱性单克隆抗体。基于免疫检测原理,建立了同时检测克百威与3-羟基克百威的间接竞争酶联免疫检测方法（ic ELISA）,对克百威和3-羟基克百威检测的平均回收率分别在94.9-111.6%和95.2-108.8%之间,IC50值分别为0.76 ng/m L和0.69 ng/m L,检测线性范围分别为0.09-13.6和0.04–18.9 ng/m L。（2）制备胶体金-单克隆抗体偶联物,基于免疫层析检测技术,开发了同时检测克百威和3-羟基克百威的胶体金免疫层析试纸条。对克百威和3-羟基克百威的检测限为7-10 ng/m L。并针对多种水样进行应用检测,排除基质干扰,适用于多种水样的检测。操作简便,检测迅速,适合野外监测和大批量样品的定性筛查。（3）基于倏逝波理论、平面波导型荧光免疫传感器和竞争免疫检测原理,建立了能够同时检测克百威和3-羟基克百威荧光免疫传感器检测方法。分别对一系列相关传感器参数进行了优化,实现了对实际样品中克百威和3-羟基克百威的自动化检测。对克百威和3-羟基克百威检测的平均回收率分别为98.7%-109.6%和94.3%-104.9%之间,IC50值分别为0.89 ng/m L和0.75 ng/m L,检测范围为0.29–2.69 ng/m L和0.12–4.59 ng/m L。检测成本低,操作简便,自动化程度高,单次检测时间约为30 min,适合大批量样品定量检测和自动化在线监测。（4）采用三种免疫检测技术,并选取海南省典型园艺产品进行检测,验证所建立的免疫检测技术在实际样品中的检测应用,所选取的12种蔬菜水果样品均未检测出克百威及3-羟基克百威残留。综合分析海南省农产品克百威及相关代谢产物的残留影响,为实际样品中的克百威残留检测和农药制剂非法添加监控提供可行办法。