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背景与目的:胃癌已成为全球癌症死亡的第二大原因。在中国,胃癌在恶性疾病中排第三。由于症状模糊,多数胃癌患者在确诊时已处于晚期。对于晚期胃癌患者,化疗仍是最重要的治疗方法。铂类,尤其是第三代铂类(奥沙利铂等)已被广泛应用于胃癌临床的一线化疗。然而,由于肿瘤固有或获得性的铂类耐药机制的存在,使得铂类药物的临床疗效不佳。此外,自噬导致的DNA损伤修复是最重要的耐药机制之一。RAD21编码的蛋白是DNA双链断裂修复和核性蛋白质。研究表明,RAD21与化疗药物的敏感性密切相关;RAD21可能成为一个新型的靶点,潜在地通过调节DNA损伤修复增强化疗药物的抗肿瘤效果。自噬参与了化疗药物介导的DNA损伤修复,并且自噬在促进肿瘤的化疗抵抗中发挥了重要的作用。这些证据提示RAD21与自噬可能有着密切的关系。尽管大量研究已证实RAD21在许多肿瘤中表达上调并与化疗药物的敏感性密切相关,但在胃癌中,它与奥沙利铂的药物敏感性关系仍然没有相关报道。本研究中,我们旨在探讨胃癌中RAD21与奥沙利铂药物敏感性的关系,并阐述其具体的发生机制。材料与方法:1.运用PCR、WB检测RAD21在胃癌细胞株和胃癌组织中的表达情况。2.运用MTT、流式及平板克隆检测siRAD21与细胞增殖、凋亡及奥沙利铂的敏感性关系。3.选择47名胃癌患者(对奥沙利铂敏感组)和9名胃癌患者(对奥沙利铂不敏感组),用免疫组化分析胃癌患者RAD21浆表达或核浆表达的无进展生存。4.构建NLS-GV141-RAD21以及NES-GV141-RAD21载体,运用免疫荧光检测RAD21不同的亚细胞定位与奥沙利铂敏感性的关系。5.运用免疫共沉淀及彗星实验探究P53、RAD21及自噬相关的化疗药物敏感性之间的关系。结果:1.各种胃癌细胞株及胃癌组织标本与对照组相比,RAD21表达水平明显上调(p<0.05)。2.干扰RAD21可增加胃癌细胞对奥沙利铂的敏感性。3.RAD21的核转位现象与胃癌患者的复发率、临床分期及不良预后密切相关(p<0.05)。4.RAD21的核转入载体组与核转出载体组相比,可明显降低胃癌细胞对奥沙利铂的敏感性。5.P53与RAD21呈现共定位并介导了 RAD21的亚细胞定位。6.干扰RAD21联合自噬抑制剂可抑制细胞增殖并最大程度地促使DNA损伤现象的发生。在此过程中,ATG5与RAD21呈明显的正相关(r=0.95,P<0.01;r=0.96,P<0.01)。结论:RAD21与奥沙利铂的敏感性密切相关;深入机制探讨,P53调控了 RAD21的亚细胞定位,并通过自噬降低了奥沙利铂的敏感性,从而促进了胃癌的进展。综上,这些结果提供了提高胃癌患者对奥沙利铂敏感性的相关策略,使RAD21成为令人瞩目的分子靶点。