【摘 要】
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超级增强子(Super Enhancers,SEs)是增强子大型集群,在个体生长发育、免疫调节、新陈代谢及癌症致病机理研究中具有重要的作用。近几年来,SEs与癌症的关系备受关注,进一步研究结肠
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超级增强子(Super Enhancers,SEs)是增强子大型集群,在个体生长发育、免疫调节、新陈代谢及癌症致病机理研究中具有重要的作用。近几年来,SEs与癌症的关系备受关注,进一步研究结肠癌中SEs功能,对于了解结肠癌的发生、发展,以及后期的临床治疗具有重要意义。 本研究选择位于人类chr1:16498296-16509788的EphA2相关的肿瘤普遍性超级增强子(EphA2-SE)为实验对象。通过双荧光素酶报告系统发现,EphA2-SE活性主要由组分增强子E1驱动。利用CRISPR/Cas9技术,在HCT-116中建立EphA2-SE敲除纯合子和杂合子细胞系,通过qRT-PCR检测发现,敲除细胞系中靶基因EphA2 mRNA表达水平显著下调,且敲除纯合子比杂合子下调更为显著。通过MTT、克隆形成实验和细胞划痕愈合实验发现,敲除EphA2-SE后,细胞增殖、克隆形成能力和迁移能力均受到抑制,且皆为敲除纯合子的抑制趋势更明显。 结果表明,EphA2-SE活性主要由E1组分增强子驱动,EphA2-SE可以通过调控靶基因EphA2表达而影响HCT-116细胞生物学特性。
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