基于适配体的食品中黄曲霉毒素B1和M1的生物传感器检测方法研究

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基于霉菌毒素的适配体,本研究开发了能够快速、灵敏检测黄曲霉毒素毒素B1(AFB1)的荧光生物传感器,能够快速、灵敏的检测AFB1首先,标记了荧光素的适配体与其标记了淬灭基团的互补DNA单链(cDNA)杂交,荧光因适配体靠近淬灭基团而被淬灭。当体系中加入AFB1后,适配体与AFB1形成复合物,导致适配体的结构发生改变,从而释放cDNA,最后适配体荧光恢复。通过监测荧光值的变化便能定量检测AFB1的浓度,在实验条件优化下,该方法的检测范围为5-100 ng·mL-1,检出限为1.6 ng·mL-1。此外,本研究选择其他7种霉菌毒素作为干扰物检测后荧光值没有明显改变,表明该适体传感器具有良好的特异性。同时,该传感器也可以应用于两种不同品牌婴幼儿配方米粉中AFB1的检测,获得的回收率分别为96.3%-106.8%和93.0%-101.2%该方法在定量和高通量检测食品中的AFB1方面有很大的潜在应用,并且检测的目标物还可以扩大到更大的范围。AFB1可以直接污染食品,或者间接污染饲料,动物采食被AFB1污染的饲料后,在奶中产生次级代谢产物黄曲霉毒素M1(AFM1)。食用被AFM1污染的牛奶会对消费者身体健康造成危害。为了阻止AFM1带来的食品安全问题和减少经济损失,开发AFM1快速,灵敏的检测方法显得尤其重要。本研究开发了一种基于AFM1适配体的生物传感器能简单、灵敏的检测AFM1。标记了荧光基团的适配体首先与其标记了淬灭基团的互补DNA单链(cDNA)杂交,导致荧光被淬灭。加入AFM1后,适配体与AFM1形成复合物,释放cDNA,因此,便能定量AFM1的浓度。该方法的检测范围为5-100 ng·mL-1,检出限为1.7 ng·mL-1。另外,对该适体传感器的特异性进行了检测,实验结果表明该方法的特异性良好,其他的霉菌毒素均不会对荧光值产生影响,并且对两种不同品牌的婴幼儿米粉进行了实际加标回收实验,回收率分别为96.4%-103.6%和95%-102.8%。此检测技术对大通量,大范围食品中的AFM1的检测具有重要的意义。
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