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糖尿病肾病(Diabetic nephropathy, DN)是糖尿病(Dabetes mellitus, DM)常见的微血管并发症,是严重的远期并发症和主要死亡原因之一,是目前严重威胁人类生命健康的疾病,因此防治DN的任务迫在眉睫。本研究在导师李建民教授前期创立的“肾络瘀痹”理论实体通络保肾方和相应工作基础上,结合DN时TGF-β1介导足细胞损伤的机制,进一步从细胞和分子水平上探讨了通络保肾方防治DN时TGF-β1足细胞损伤的作用,为临床治疗DN提供更好的实验依据。实验一目的：探讨通络保肾复方对肾小球足细胞增殖的影响；方法：大鼠肾小球足细胞通过高糖和LPS刺激后,给予不同浓度通络保肾复方含药血清干预,采用MTT法检测12h、24h、36h和48h时足细胞的增殖影响；结果：LPS刺激后12h、24h、36h及48h各时间点细胞明显增殖。厄贝沙坦组和通络保肾复方组对LPS诱导的足细胞增殖有不同程度的抑制,起效时间均为12h(p<0.05),通络保肾复方最佳抑制时间为第24h,以通络保肾大剂量组效果好；结论：通络保肾复方含药血清可以抑制高糖环境下LPS诱导的肾小球足细胞增殖。实验二目的：探讨通络保肾复方对肾小球足细胞蛋白表达的影响；方法：通过高糖和LPS刺激大鼠足细胞,给予大鼠的含药血清干预后,进行细胞爬片,用细胞免疫组化法检测大鼠肾小球足细胞TGF-β1蛋白的表达。提取细胞胞浆蛋白后,用Western blot检测足细胞TGF-β1蛋白的表达；RT-PCR检测足细胞TGF-β1mRNA的表达,实验数据均用SPSS 16.0进行统计学处理。结果：①免疫组化图像分析比较各组平均光密度值,正常组大鼠肾小球足细胞中有少量TGF-β1表达。高糖、LPS组肾小球足细胞TGF-β1表达强阳性。与高糖、LPS组比较,厄贝沙坦、通大组表达明显减少(P<0.01),通中组表达减少(P<0.05)。②Western blot:与正常组比较,高糖、LPS组足细胞TGF-β1蛋白表达明显升高(P<0.01)。与高糖、LPS组比较,厄贝沙坦、通大组足细胞TGF-β1蛋白表达含量都明显降低(P<0.01),通中组降低(P<0.05),提示厄贝沙坦组和通络保肾复方组都可以抑制足细胞中TGF-β1蛋白的表达；③RT-PCR：与正常组比较,高糖、LPS组足细胞TGF-β1mRNA表达显著增加(P<0.01)；与高糖、LPS组比较,厄贝沙坦组和通大组足细胞TGF-β1mRNA表达显著降低(P<0.01),通中组降低(P<0.05),且治疗组之间TGF-β1mRNA表达量无显著性差异,通络组以通络大剂量的表达量最少。结论：通络保肾复方含药血清通过抑制高糖环境下LPS诱导的足细胞分泌TGF-β1蛋白和基因表达,可能是通络保肾复方延缓肾小球硬化的重要作用机制。