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木聚糖(Xylan)是一类分子结构变化范围很大的多糖,其主链由D-木糖以β-1,4-糖苷键连接而成,侧链是由许多短的取代基组成。它是自然界中仅次于纤维素的一类多糖,分布广泛,是一种重要的可再生资源。木聚糖酶是人类利用木聚糖的重要工具,它在造纸、食品、饲料、生物质转化以及果汁、酒类、咖啡、香料和色素生产等方面有着广泛的应用前景,已经引起越来越多研究者的重视。目前在木聚糖酶应用时仍存在木聚糖酶活力低、真菌木聚糖酶耐碱性较差等问题,大大阻碍了其在工业化生产中的应用。鉴于上述原因,筛选耐碱性高产木聚糖酶的菌株一直是相关行业一个重要的研究方向。本文以实验室筛选的菌株ZCF58为出发菌株,其产生的木聚糖酶最适pH为7.0,酶活力为272.7IU/mL,具有潜在的应用价值。本论文通过硫酸二乙酯和甲基磺酸乙酯诱变处理后,筛选到了一株木聚糖酶活力较高的突变株1-35-2,传代5次后产酶能力仍然稳定性良好,生产的木聚糖梅活力较出发株提高了19.8%。常压室温等离子体诱变技术是近年来发展起来的一种新型诱变技术,本文以获得诱变高效菌株为研究目的,采用等离子体诱变结合透明圈筛选方法,获得了遗传性状稳定的优势菌株L-9-L-10,其木聚糖酶活力较出发株提高了461%。采用该突变株生产的木聚糖酶的粗酶液对预处理的玉米芯进行酶解实验,结果表明:该酶液具有一定的内切木聚糖酶活力,且木糖苷酶活力较低,可用于生产低聚木糖。CRE蛋白是在酵母和丝状真菌中普遍存在的一种碳源代谢抑制因子。人们发现瑞氏木霉和曲霉纤维素酶基因、半纤维素酶基因和果胶酶基因都由CRE蛋白调控。通常敲除或突变cre基因后会导致酶基因在葡萄糖存在时的去阻遏或部分去阻遏。同时,突变株的半纤维素酶基因的表达量也会提高。本文采用TAIL-PCR和SEFA-PCR方法扩增得到了creA基因的侧翼序列,并采用融合PCR构建了creA基因敲除盒,为进一步采用原生质体转化方法敲除ZCF58的creA基因,提高菌株产木聚糖酶的能力打下了基础。