顺铂、紫杉醇对TC-1细胞表面PD-L1表达的影响及机制研究

来源 :昆明医科大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:gulongliu
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[目的]:探讨顺铂、紫杉醇对宫颈癌TC-1细胞表面程序性凋亡配体PD-L1表达的影响及其作用机制,为提高宫颈癌化疗效果提供理论依据。[方法]用MTT方法测定顺铂、紫杉醇对TC-1细胞的增殖活力的影响,筛选顺铂、紫杉醇的最适作用浓度。首先,检测顺铂、紫杉醇对TC-1细胞表面PD-L1表达的影响,细胞分为顺铂组、紫杉醇组、阴性对照组,顺铂组、紫杉醇组应用最适作用浓度的顺铂、紫杉醇处理TC-1细胞,阴性对照组用生理盐水处理TC-1细胞,24h后在显微镜下观察细胞形态,免疫组化方法检测顺铂、紫杉醇对TC-1细胞表面PD-L1表达的影响;其次,研究PKD阻断剂(GO6976)对顺铂、紫杉醇引起的TC-1细胞表面PD-L1表达的影响,应用顺铂联合PKD阻断剂(GO6976)、紫杉醇联合PKD阻断剂(GO6976)处理TC-1细胞,24h后应用免疫组化方法检测TC-1细胞表面PD-L1表达的变化。[结果](1)顺铂、紫杉醇对TC-1细胞具有显著的形态改变及增殖抑制作用。顺铂、紫杉醇对TC-1的IC50分别是25.5μg/ml、40μg/ml。(2)顺铂处理细胞24h后TC-1细胞表面PD-L1的表达为64.96%±11.55%;紫杉醇组为88.48%±13.44%;,阴性对照组为39.59%±5.99%。与阴性对照组相比,顺铂、紫杉醇处理后的TC-1细胞表面PD-L1表达显著增加,与阴性对照组相比差异有统计学意义(p<0.05)。紫杉醇处理后的TC-1细胞表面PD-L1表达显著高于顺铂处理后的TC-1细胞表面PD-L1的表达,差异有统计学意义(p<0.05)。(3)顺铂联合PKD阻断剂GO6976处理TC-1细胞,24h后TC-1细胞表面PD-L1的表达为61.56%±3.43%,顺铂单独处理的TC-1细胞表面PD-L1表达为79.54%±5.09%,二者表达差异具有显著性(p<0.05)。紫杉醇联合PKD阻断剂GO6976处理TC-1细胞,24h后TC-1细胞表面PD-L1的表达为79.71%±4.66%,紫杉醇单独处理的TC-1细胞表面PD-L1表达为96.80%±2.50%,二者表达差异具有显著性(p<0.05)。PKD阻断剂GO6976显著抑制顺铂、紫杉醇对TC-1细胞表面PD-L1表达的增加程度。[结论]顺铂、紫杉醇可增加TC-1细胞表面PD-L1的表达,其可能是通过PKD途径发挥作用的;阻断PKD途径可显著抑制顺铂、紫杉醇使TC-1细胞表面PD-L1表达增加的程度。
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