3-MA对人腮腺成纤维细胞Hs917.T放射敏感性的影响及其机制研究

来源 :苏州大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:pngegeok
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:本研究主要通过药物3-MA抑制人腮腺成纤维细胞Hs917.T中的自噬,探讨3--MA对于Hs917.T细胞株放射敏感性的影响及其潜在的作用机制,拟为头颈部放疗的体内模型研究提供一定的理论依据。  方法:⑴Western blot法及GFP-LC3质粒转染法分析不同剂量X射线(选取0、2、4、6、8Gy5个剂量点)作用于Hs917.T细胞对自噬水平的影响;⑵3-MA抑制自噬对Hs917.T细胞放射敏感性的影响及其机制:1、Western blot法验证3-MA对Hs917.T细胞内自噬相关蛋白的抑制效果;2、克隆形成实验分析3-MA联合X线照射对Hs917.T细胞克隆存活率的影响;3、GFP-LC3质粒转染后荧光显微镜下观察3-MA对受照后的Hs917.T细胞自噬凝集簇形成的影响;4、流式细胞术检测3-MA对受照后Hs917.T细胞的凋亡影响;5、Western blot法分析自噬相关蛋白LC3、Beclin1和凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax表达的变化。  结果:①X射线在0~8Gy剂量范围内可诱导Hs917.T细胞自噬水平的上调,且随着剂量的增加自噬水平也相应增加,呈现一定的剂量依赖性,后续实验选用8Gy作为处理剂量。②MTT结果显示2mM3-MA处理24h对Hs917.T细胞无明显毒性作用,同时GFP-LC3质粒转染法及Western blot法提示3-MA(2mM、24h)对自噬抑制效果明显,因此选择3-MA(2mM、24h)作为后续实验研究;克隆形成实验结果显示:Hs917.T单纯照射组和照射联合3-MA组的平均致死剂量D0分别为2.36Gy和1.97Gy,准域剂量Dq分别为1.01Gy和0.93Gy,3-MA对Hs917.T细胞的放射增敏比(SER)为1.20;GFP-LC3凝集簇实验结果显示:3-MA联合电离辐射组相比于单纯照射组Hs917.T细胞内绿色凝集簇明显减少;Annexin V-FITC流式细胞检测结果显示,与单纯照射组相比,3-MA联合照射组明显增加Hs917.T细胞的凋亡;Western blot显示3-MA联合照射组与单纯照射组比较,Hs917.T细胞内的自噬相关蛋白Beclin1表达降低,凋亡相关蛋白Bax表达升高。  结论:电离辐射(X射线)可明显诱导Hs917.T细胞内自噬表达增加;3-MA可明显降低受照后Hs917.T细胞内的自噬表达,提高Hs917.T细胞的放射敏感性,可能与3-MA增加受照后Hs917.T细胞内的凋亡表达相关。
其他文献
电视新闻传播在新技术的背景下,其“生态环境”发生了巨大变化,对于电视新闻从业者来说,需加强五个意识:现场意识、言论意识、个性意识、全局意识、效益意识。
摘要:本文分析了生态式区域活动中材料投放的目的性不强,区域设置形式化严重,在区域活动中,教师难以精确掌握自身的角色定位等现状,我们提出了陶行知教育思想指导下的幼儿园生态型区域活动创建策略:一是注意区域活动和集体活动之间积极互动与动态变化,二是要关注生态式幼儿园区域活动对原有区域活动的超越,三是在平等的基础上,增强区域活动与家庭非区域活动的相互作用。  关键词:幼儿园;生态型区域活动;陶行知思想  
摘要:班级是构成学校的最基本的集体单位。班主任作为班级管理的主要责任人,应该掌握一些管理艺术和管理技巧,在把握学生的特点的前提下,用相应的管理及教育艺术来进行对班级的管理活动。本文主要和大家探讨一下,初中班主任如何通过把握以及应用班级管理和学生教育的艺术,以实现完善班级的管理体系的目的。  关键词:班级管理;教育艺术;探索  学校管理水平能否得到显著提高,主要取决于每个班级管理水平的高低,因为班级
色彩做为基础教学在美术教学中非常重要,对于学生来色彩基础有一定复杂性.本文从色彩的情感表达入手,采用“启发—引导—练习—评讲”的教学模式.将情感与色彩结合认知的教学
◆摘 要:随着教育信息化的不断发展,教育领域涌现出许多新型的教学工具,尤其是交互式电子白板的运用,不仅能活跃课堂氛围,丰富教学内容,还能充分调动学生学习的能动性和自主性,提高学习效率和教学质量。交互式电子白板的交互功能、应用功能极其强大,将其应用到小学语文教学中,能为师生和生生之间的互动提供良好的技术支撑,优化学生的自主探究学习,达到教学实效性提升的目的。本文针对利用交互式电子白板提高小学语文教学
数字化影象技术已经经历了数年的发展,逐渐由试验阶段、推广阶段,走向了成熟阶段。同时摄影界对数码科技的认识也从好奇、观望,走向了认同与接纳。数字化技术对摄影界带来的并不
传统酒店专业技能课堂中教学与实践相脱节问题已成为中职酒店管理专业课堂变革的重点与关键.《教育部关于进一步深化中等职业教育教学改革的若干意见》指出,工学结合是具有中
三年级刚开设英语,学生的负担比二年级明显加重.我采用蚂蚁啃骨头的方法,一天布置一点任务,基础好一点的,稍微多一点,基础差一点的任务少一点,并教他们一点一点地记,积少成多
期刊
相信学生,依靠学生,走学生主体化发展道路,是班主任工作的必然方法。这就需要班主任在班级德育工作中多一点“过程”意识,加强“过程”管理,即把道德教育寓于班集体的发展和