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芸苔属蔬菜是一类重要的蔬菜作物，在我国种质资源丰富，大多数芸苔属蔬菜属异花授粉作物，杂种优势明显。使用常规方法，选育一个纯合的自交系或自交不亲和系一般需要5-8年时间。而运用小孢子培养技术在1-2年就可以获得大量纯合的双单倍体植株。目前，大部分芸苔属蔬菜均是利用自交不亲和系来生产F1代杂交种。自交不亲和性广泛存在，但自交不亲和性强度及S单元型类型鉴定相当繁琐。本研究的目的主要是想结合小孢子培养与自交不亲和性的分子鉴定，建立一套快速而高效的育种体系。 本研究选取大白菜、红菜苔和甘蓝3种芸苔属蔬菜，研究了影响小孢子培养和植株再生过程中的诸多因素，获得了大量胚状体和再生植株。并对其后代植株的倍性，遗传多样性，白交不亲和性的强度、分子遗传及表达进行了分析。最后，调查了目前我国主要的几种芸苔属蔬菜中自交不亲和S单元型的类型。主要结果如下： 1．小孢子培养因素研究 对小孢子培养过程中基因型、小孢子发育时期、活性炭、小孢子密度、蔗糖浓度、高温预处理和大量元素浓度等7种因素进行了研究。在73.3％的大白菜，76.9％的红菜苔，50％的甘蓝基因型中获得了小孢子胚状体。选择单核靠边期比率为50-70％的小孢子，将密度设为1.5-2个花蕾／ml，添加0.3mg／ml活性炭有利于大白菜和红菜苔小孢子胚胎发生。而选择含10-30％的双核期小孢子，将密度设为1.5个花蕾／皿，添加0.1mg／ml有利于甘蓝小孢子胚胎发生。蔗糖浓度为13％时，在3种芸苔属蔬菜中均获得了较好的结果。另外，在32℃热激处理18h，将大量元素的浓度减少一半有利于大多数红菜苔基因型的小孢子胚胎发生。 2．植株再生因素研究 对胚状体再生过程中琼脂浓度，胚龄，低温预处理和培养基类型等4种因素进行了研究。在10个大白菜，9个红菜苔和2个甘蓝基因型中获得了大量再生植株。结果表明，琼脂浓度为1.2％，在4℃下处理10d，均能显著促进3种蔬菜的植株再生；大白菜和红菜苔最适胚龄为20-29d，而甘蓝为30d以上；B5和MS两种培养基对植株的再生没有明显的影响。 3．DH植株倍性鉴定 对3种芸苔属蔬菜获得的小孢子植株的倍性鉴定后，发现大白菜自然加倍率不同品种间变化较大，但都在50％以上，红菜苔的自然加倍率相当高，达到70％以上，而甘蓝的自然加倍率较低，在30％左右。 4．DH群体内自交不亲和性的分子鉴定与遗传 利用class Ⅰ和class Ⅱ的SLG和SRK特异引物，对3种芸苔属蔬菜7个DH群