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甲磺酸伊马替尼,为2-苯胺基嘧啶衍生物,是靶向治疗白血病的药物。通过占据Bcr-Abl酪氨酸蛋白激酶的SH1区域的ATP结合位点,从而对ATP、ATP底物与酪氨酸激酶催化中心的结合进行竞争性抑制,阻断酪氨酸激酶的自身磷酸化和其底物的磷酸化,切断了异常的酪氨酸激酶的信号传导,从而达到抗肿瘤的目的。由于具有这种独特的机制,因此甲磺酸伊马替尼可以靶向作用在病变细胞上,并对正常细胞没有影响或影响很小。该药自临床应用以来,已显示出其特异性、高效性和低毒性。保证药品安全有效,质量控制是基础和前提,要达到有效控制药品质量,就需在多层面充分控制质量。本研究建立了甲磺酸伊马替尼及其片剂的质量标准,并对分析方法进行研究验证,对保障产品的质量稳定、安全有效具有重要意义。主要研究分为以下两部分:第一部分甲磺酸伊马替尼质量标准研究目的:研究甲磺酸伊马替尼性状、鉴别、检查、含量等测定方法,为制定质量标准提供理论依据。方法:性状分别对外观、晶型、溶解度、引湿性、熔点、粒度等进行考察。鉴别分别采用化学法、红外分光光度法、高效液相色谱法对其进行鉴别。检查依据中国药典(2010年版二部)附录对本品的酸度、氯化物、水分、炽灼残渣、重金属等进行检查;分别采用HPLC法、LC-MS法、GC-HS-MS等检测方法对有关物质、起始原料N-(5-氨基-2-甲基苯基)-4-(3-吡啶基)-2-氨基嘧啶(T4)、反应副产物甲磺酸甲酯、甲磺酸乙酯、甲磺酸异丙酯等进行检测;采用离子色谱法考察了甲磺酸含量;对工艺中用到的甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、四氢呋喃、N,N-二甲基甲酰胺(DMF)等溶剂的残留量进行考察。含量测定采用HPLC法测定含量。结果:性状甲磺酸伊马替尼为白色至淡黄色结晶性粉末;无臭;无或几乎无引湿性;在水中易溶,在甲醇和乙醇中略溶,在乙酸乙酯和丙酮中几乎不溶;熔点218-222℃。鉴别供试品甲磺酸盐鉴别应显正反应;红外光谱中供试品应与对照品吸收光谱一致;含量测定项下,供试品溶液主峰的保留时间应与对照品溶液保留时间一致。检查酸度:供试品10 mg/m L水溶液p H应为5.0-6.0;供试品氯化物不得过0.01%;水分:不得过0.5%;炽灼残渣:在500-600℃炽灼,残渣小于0.1%;重金属:取炽灼残渣项下残留的残渣依法测定,重金属含量低于10 ppm;有关物质:与含量测定一致,采用高效液相梯度洗脱法进行测定,各杂质与主峰分离度良好,强制降解后主峰峰纯度符合要求,各杂质与主峰分离度符合要求,表明方法专属性强,灵敏度高;分别采用LC-MS、GC-HS-MS法检测起始原料T4及反应副产物甲磺酸甲酯、甲磺酸乙酯、甲磺酸异丙酯,方法灵敏度与准确度高,检出充分,供试品均符合规定;残留溶剂中的甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、四氢呋喃及DMF残留量均符合规定。含量测定采用HPLC法梯度洗脱测定本品的含量,主峰纯度符合要求,专属性强,在0.06-2.16 mg/m L范围内线性关系良好,对照品及供试品溶液稳定性良好,室温置18 h稳定,供试品含量按无水物计,含甲磺酸伊马替尼均在98.0%-102.0%。结论:通过对甲磺酸伊马替尼的性状、鉴别、检查及含量测定进行全面方法学考察,建立了准确、灵敏的分析方法,为建立甲磺酸伊马替尼质量标准提供参考。第二部分甲磺酸伊马替尼片剂质量标准研究目的:对甲磺酸伊马替尼片的性状、鉴别、检查及含量测定进行研究,为其质量标准的制定提供理论依据。方法:性状采用目视法对甲磺酸伊马替尼片的外观性状进行测定。鉴别通过化学法、高效液相色谱法对其进行鉴别。检查依据中国药典(2010年版二部附录片剂通则)对本品的重量差异和微生物限度等进行检查;分别采用HPLC法检测本品有关物质;溶出度以0.1 mol/L的盐酸溶液1000 m L为溶出介质,转速为每分钟50转,依法操作,于15 min时取样测定,检测方法为紫外-可见分光光度法,测定波长为268 nm。含量测定同甲磺酸伊马替尼采用HPLC法测定。结果:性状甲磺酸伊马替尼为深黄色至棕黄色双凸的薄膜衣片,除去包衣后显白色至淡黄色。鉴别供试品甲磺酸盐鉴别反应呈正反应;含量测定项下,供试品溶液主峰保留时间与对照品溶液主峰保留时间应一致。检查依法检查本品重量差异及微生物限度,均符合规定;溶出度采用紫外-可见分光光度计法进行测定,测定波长为268 nm,辅料对测定无干扰,甲磺酸伊马替尼在2.0-12.0μg/m L范围内线性良好,在80%-120%范围内平均回收率为99.3%,RSD为0.5%,方法准确度高。有关物质与含量测定条件同甲磺酸伊马替尼有关物质及含量检测条件一致,辅料对测定无干扰,杂质检出能力高,方法专属性强。含量测定在0.06-2.16 mg/m L范围内线性良好,线性方程y=31752x+665.3,相关系数r=0.9995,在80%-120%范围内平均回收率为99.8%,RSD为0.6%。三批供试品含量均在含伊马替尼为标示量的95.0%-105.0%内。结论:对甲磺酸伊马替尼片的性状、鉴别、有关物质、溶出度及含量等进行全面方法学考察,建立了准确、灵敏的分析方法,为建立甲磺酸伊马替尼片质量标准提供参考。