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本研究以蝴蝶兰（Phalaenopsis amabilis）种子幼胚无菌体系为试验材料，采用根癌农杆菌介导法对蝴蝶兰ACS反义基因的遗传转化进行了较为全面的研究，并以授粉过的蝴蝶兰唇瓣为材料进行了ACS基因的克隆研究，主要的研究结果如下：1蝴蝶兰再生系统的优化。通过不同激素配比、天然附加物的筛选建立了以淡黄色、细小原球茎为受体系统，并通过对比不同激素浓度、吸附剂、接种处理方式、光照强度及继代时间、培养方式等影响因素，优化蝴蝶兰转基因受体系统。结果表明：在暗室条件下于KC+6-BA6.0mg／L+NAA0.2mg／L+AC0.5mg／L+Pj100g／L培养基中培养50d可诱导出蝴蝶兰细小原球茎，并适合其增殖；在光照培养条件下于KC+6-BA3.0mg／L+NAA0.5mg／L+AC1.0mg／L+Pj150g／L有利于原球茎的分化出芽，于KC+6-BA2.0mg／L+NAA0.5mg／L+AC1.0mg／L+Pj150g／L培养基上有利于芽苗生根壮苗；去掉顶端的细小原球茎适宜作为蝴蝶兰遗传转化的直接受体；蝴蝶兰原球茎对卡那霉素不大敏感，500 mg／L才能使原球茎致死，但150mg／L就能限制其生根，因此，150mg／L卡那霉素可作为生根培养时的选择压进行抗性筛选。2以根癌农杆菌介导的ACS反义基因导入蝴蝶兰，并对转化体系进行了优化研究。试验结果表明，稳定转化试验条件为不经预培养的蝴蝶兰原球茎，侵染前采用去掉顶端或针刺的处理方式，并在附加0.2 mg／L甘露醇的高渗固体培养基前处理4h，农杆菌重悬液浓度为OD6000.3左右，接菌时间为20 min，在25℃黑暗条件下于KC+6-BA6.0mg／L+NAA0.2mg／L培养基中共培养4 d，共培养培养基pH值为5.4。3建立了蝴蝶兰抗性原球茎筛选的技术体系，获得了再生植株，并进行转基因检测。对转化ACS反义基因的转化体进行抗性筛选及转基因植株再生研究，对原球茎再生植株叶片进行GUS稳定表达检测。采用延迟筛选法先对侵染过的原球茎在KC+6-BA6.0mg／L+NAA0.2mg／L+AC0.5mg／L+Pj100g／L+200mg／LCef培养基上进行恢复生长一个月，再置于KC+6-BA6.0 mg／L+NAA0.2mg／L+AC0.5 mg／L+Pj150g／L+Km500mg／L+Cef200mg／L培养基下筛选一个月，选择后的原球茎置于附加200mg／LCef的KC+3.0mg／L6-BA+NAA0.5mg／L+AC 0.5mg／L+Pj150g／L分化培养基上进行出芽培养，将分化的植株转移到加有150mg／L卡那霉素和200mg／LCef的KC+6-BA2.0mg／L+NAA0.5mg／L+AC1mg／L+Pj150g／L生根培养基中进行生根培养，共获得了7株具卡那霉素抗性的小植株，经GUS组织化学检测，gus基因已整合进蝴蝶兰。4蝴蝶兰唇瓣ACS基因保守序列的克隆研究。利用改良Trizol法建立了蝴蝶兰花瓣（唇瓣）总RNA提取和纯化方法，解决了蝴蝶兰花瓣中组织器官内多糖、多酚类物质的干扰问题。利用逆转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）得到在蝴蝶兰授粉48h后唇瓣中特异性表达的ACS基因保守序列。DNA序列分析表明，所获得蝴蝶兰的ACS cDNA的序列全长为925bp，可能编码308个氨基酸。该序列与已发表的ACS基因有很高的同源性。本研究对转基因技术在蝴蝶兰品种改良上有重要意义，并为蝴蝶兰转基因的研究提供了技术平台，同时为进一步构建自身载体，探讨表达调控的相关机理奠定了一定的基础。