近年来,由微生物细胞内提取的聚3-羟基丁酸酯(PHB)生物材料在药学界引起了广泛的关注,其原因之一是在制备过程中,不存在单体与引发剂等有害物质,因此,它比其他人工合成可降解聚酯类材料,如:聚乳酸(PLA)、聚乙醇酸(PGA)、聚己内酯(PCL)等具有更好的临床应用价值;原因之二是降解周期适中,较为适合作为药物中长期传输的载体。随着生物技术和基因工程的不断发展,许多具有药理活性的多肽和蛋白质在一定程度上成为治疗一些疾病的优选药物。然而,较高的分子量使它们很难通过生物膜以及其在胃液中的不稳定性使其很难进行口服使用。另外,频繁地注射使用一方面病人的顺应性差,另一方面昂贵的费用让病人很难接受。针对以上缺点,寻求一种能够阶段性的注射并能够控制释放的注射剂迫在眉捷。可降解性的注射性微球就是这样一种理想的制剂,它能够克服多肽类药物一系列的缺点。本文选用PHB为药物载体,设计采用水/油/水((W1/O)/W2)复乳法制备PHB微球,以期在PHB作为药物控释载体的应用方向有所进展。本论文首先采用(W1/O)/W2复乳法,以PHB为药物的载体、牛血清白蛋白(BSA)为模型药物制备了BSA-PHB微球。探讨了油相中PHB浓度、外水相中聚乙烯醇(PVA)浓度、油水体积比(W1/O)和初乳与外水相的体积比(W1/O)/W2四个因素对微球性质的影响。通过改变实验参数,微球的粒径大小在6.9μm和20.3μm之间波动。微球表面呈现不同程度的孔隙结构。微球中BSA的最小包封率为7.5%,最大的包封率为69.8%。采用体外释放实验验证微球作为药物控制释放载体的可行性。亲水性药物从聚合物微球中连续释放,主要取决于聚合物的降解和药物的扩散。根据聚合物降解的规律和机制,骨架微球中药物的释放可分为3个阶段:①突释期,微球表面或近表面的部分药物迅速释放;②缓慢释放期,药物通过扩散或缓慢迁移的方式,由聚合物骨架溶蚀形成多孔结构缓慢释放;③快速释放期,随聚合物不断的降解骨架结构破坏,药物出现第二次大量释放。由于PHB较长的降解周期,所以我们所制备的微球中药物体外释放的机制主要为药物的扩散,释放过程主要为突释期和缓慢释放期。为期28天的体外释放实验验证了微球作为药物中长期控制释放载体的可行性。微球中药物的释放符合Higuchi扩散方程。确定了微球的较佳制备工艺,以微球中BSA的高载药量、高包封率和微球中BSA的较小的突释率为综合考察指标,确定了工艺条件如下:PHB浓度30mg/ml、PVA浓度20mg/ml、BSA浓度30mg/ml、W1/O为1:5、(W1/O)/W2为1:1。差示扫描量热图谱中,BSA-PHB微球中只出现了PHB的熔点峰,而没有出现BSA的熔点峰。由此可推断,BSA是以分子状态分散在BSA-PHB微球中。分别采用体外细胞毒性实验和活体组织相容性实验对BSA-PHB微球的细胞相容性和组织相容性进行评价。体外细胞毒性实验结果表明,用浸提原液培养细胞96小时后,L929小鼠成纤维细胞呈棱形或不规则三角形,贴壁生长良好,脱落细胞较少,无明显的细胞溶解和细胞膜的变化。微球的浸提液从低浓度到高浓度细胞毒性均合格。并且,细胞毒性的大小与浸提液的浓度大小呈依赖关系。得出缓释微球具有良好的细胞相容性。组织学研究发现,微球植入大鼠皮下后所有动物的活动及进食皆正常,伤口无红肿、渗液等炎性反应。正常对照组具有轻微的炎症反应程度。随着时间的推移,缓释微球对机体的炎症反应逐渐减轻。说明微球具有良好的组织相容性。由此得出本实验室所制备的BSA-PHB微球具有良好的生物相容性,显示其有望作为药物的控释载体开发应用于机体。微球的稳定性实验通过考察加速实验、室温留样实验和4℃低温实验条件下微球外观性状、平均粒径、载药量、包封率、突释率、渗漏率、粒径分布、体外释放行为和BSA与PHB之间的相互作用的变化来评价。结果表明,BSA-PHB微球样品经过4℃低温留样实验后微球的外观性状、平均粒径、载药量、包封率、突释率和渗漏率没有发生很大的变化。粒径分布、体外释放行为和BSA与PHB之间的相互作用也没有发生明显的变化。室温实验条件下,除了微球中BSA的突释率呈增加的趋势外,微球的其它性质几乎没有发生很大的变化。加速实验条件下,微球的性质发生了比较明显的变化。从而得出微球在加速实验条件下稳定性不是很好。因此我们认为,微球应该在4℃低温下保存。本文成功利用复乳化-溶剂蒸发法制得胰岛素-聚羟基丁酸酯微球。平均粒径为14.5±1.32μm,具有一定的分布范围。由扫描电镜照片可见,微球呈完整的圆球形。单个微球观察,微球表面明显具有大量的微孔结构,这些微孔结构可能是药物扩散的主要通道。按照胰岛素-聚羟基丁酸酯微球的制备工艺制备了6批微球,微球载药量为(4.3±0.56)%,药物包封率为(70.5±1.02)%。结果表明,微球的制备工艺稳定,重现性良好。胰岛素-聚羟基丁酸酯微球体外释放具有明显的突释效应(24h),随后进入缓慢释放期,28天的累积释放量为43.5%。体外释放行为符合Higuichi扩散方程,方程式为Q=0.07319t1/2+0.06523( r=0.97384)。胰岛素-聚羟基丁酸酯微球对糖尿病大鼠降血糖作用初步实验表明,本实验室所制备的胰岛素-聚羟基丁酸酯微球中的胰岛素生物活性得到了一定的保持。为研制符合临床治疗需要的中长效注射制剂提供实验依据。