目的 眼表上皮包括角膜上皮和结膜上皮,其结构和功能的完整性对于保持眼表环境的稳态起到至关重要的作用。正常状态下,角膜和结膜上皮不断进行自我更新和自我修复,更新的原动力来自眼表上皮干细胞。近年来,针对角膜上皮干细胞的基础研究和临床应用已经取得丰硕的成果,而对于结膜上皮干细胞的研究尚处于起步阶段。关于结膜上皮干细胞的定位,各家研究仍然存在争论。研究多数集中于动物试验,而对于胎儿结膜上皮干细胞的研究尚未见报道。我们利用免疫组织化学方法,对孕晚期胎儿结膜的角蛋白K7、K19,以及AE5、MUC5A/C、PCNA、P63等指标的表达情况进行研究,推测结膜干细胞的分布规律,为进一步明确结膜干细胞的定位提供依据。 方法 实验材料取自正常引产或产后窒息死亡6小时内的孕晚期(胎龄28周以上)胎儿8例(16只眼),所有病例均无遗传病史及孕期感染病史,且取材得到了医院及患者的许可。胎儿性别分布为5男3女。带眼睑取出完整眼球,除去皮肤及皮下组织(保留睑缘),切除后部巩膜。以眼科剪沿矢状面剪取长条状眼球组织,包括睑缘、全部睑结膜、穹隆部结膜、球结膜及部分角膜组织。多聚甲醛固定,常规石蜡包埋并制切片。常规染色观察,确定睑缘、睑结膜、穹隆结膜、球结膜及角膜缘上皮细胞的位置及其形态结构。SP法免疫组织化学染色,光学显微镜下观察各部位K7、K19及AE5、MUC5A/C、PCNA、P63的表达情况并进行图像采集。