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原癌基因HER2是人类表皮生长因子受体家族的成员之一，具有重要的信号转导作用。人类HER2基因定位于染色体17q21，由922个腺嘌呤、1,382个胞嘧啶、1,346个鸟嘌呤和880个胸腺嘧啶组成。主要于胚胎时期开始表达，正常的成年人机体组织中表达很低，甚至不表达，其表达的产物被称为HER2蛋白，HER2蛋白是具有酪氨酸蛋白激酶活性的跨膜蛋白。HER2蛋白在多种肿瘤组织中呈高表达状态，对肿瘤细胞的生长、分化及存活有着重要的调节作用，能够抑制细胞凋亡，促进肿瘤细胞生长。因此，检测肿瘤抗原HER2蛋白的表达，对肿瘤鉴别、诊断和预后判断均有重要意义。临床上在对癌症患者的检查中发现，患者癌症病变的发生、肿瘤的复发和预后与HER2的过度表达成正相关。HER2在乳腺癌细胞中的过度表达，预示着肿瘤的恶性程度高，术后易发生转移和复发。因此HER2基因及其表达产物的研究成为临床乳腺癌诊断和治疗研究的热点，对癌症的预防和治疗具有重要意义。本研究的目的主要是对HER2蛋白纯化工艺进行研究，制备出高纯度的HER2蛋白，为HER2的应用研究奠定基础。本实验研究中采用高表达HER2蛋白的人乳腺癌组织为原材料，对HER2蛋白进行分离和鉴定。HER2蛋白定位于细胞膜，因此，本研究以乳腺癌组织作为样本，首先采用高速组织匀浆技术、超声波破碎的方法使得膜内蛋白释放出来；再根据蛋白质分子大小、所带电荷的差异，采用盐析技术、超滤技术对组织匀浆中的蛋白质进行分级分离；最后采用离子交换层析、凝胶过滤层析技术对目的蛋白进行精细分离。整个分离提纯的过程中采用ELISA试剂盒进行HER2特异性检测，采用SDS-PAGE进行分子大小和纯度分析。结果显示，采用本研究提纯工艺，成功的从乳腺癌组织中成功制备得到HER2蛋白。经SDS-PAGE分析显示分子大小为185kD， Western-blot和ELISA检测结果表明所制备蛋白具有HER2免疫活性，与文献报道相符。HER2蛋白纯化和鉴定工艺的建立，为HER2蛋白的大量制备及应用研究奠定基础。