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随着社会的不断发展,高效液相色谱(HPLC)作为一种通用的检测手段由于其高效的分析分离能力已被广泛应用于生化分析、医药检测、食品安全、环保检测等各个领域。但有时因为样品本身的性质和低含量的原因不能用该方法进行有效的检测分析,如脂肪酸、生物胺、氨基酸等,它们都具有极低的紫外吸收,因此一般的分光光度法很难实现准确测定。目前柱前荧光标记集合高效液相色谱技术已经广泛应用于分析化学领域,利用荧光检测技术可以使不发光的化合物衍生为发射荧光的化合物,使得该技术在灵敏度选择上具有很强的优势。本论文建立在基于几种新型荧光标记试剂,包括(2-(11H-苯[a]咔唑)乙基对甲苯磺酸酯(BCETS)、2-[2-(7H-双苯并[a,g]咔唑)-7-乙氧基]氯甲酸乙酯(DBCEC)和苯并吖啶酮-5-乙酸酰肼(BAAH)的脂肪酸及氨基酸的高灵敏HPLC分析方法使得衍生反应条件和色谱分离条件得到优化,并在其他实际样品中做了应用。具体包括以下四章内容:第一章HPLC及化学衍生化的应用方法。第二章以二氧化碳超临界萃取法提取八角中的籽油。对提取压力、温度和溶剂(乙醇)进行三因素三变量的响应面优化,萃取条件为压力:27.72Mpa、温度:46.22。C、溶剂用量:8.58%。最大产油量为25.31±0.22%。以2-(11H-苯[a]咔唑)乙基对甲苯磺酸酯(BCETS)作为衍生化试剂,对二氧化碳超临界萃取所得的八角籽油中的脂肪酸含量进行分析鉴定。实验证明,八角籽油中含有大量脂肪酸,其中不饱和脂肪酸的含量由高到低依次为C18:2,C18:1,C18:3和C20:4。第三章以高选择性和灵敏度的2-[2-(7H-双苯并[a,g]咔唑)-7-乙氧基]氯甲酸乙酯(DBCEC)做为衍生化试剂标记20种氨基酸,并首次采用响应面法对衍生化条件进行优化,通过梯度洗脱,在Hypersil BDS C18柱上实现了20种氨基酸的基线分离。20种氨基酸的检测线为0.19-1.17fmol/μL,并有良好的重现性和线性相关系数。将此方法运用于人体血清的分析,结果满意,显示出此方法对于分析复杂生理溶液、人体或植物组织等生物样品的巨大潜能。第四章使用苯并吖啶酮-5-乙酸酰肼(BAAH)作为衍生化试剂,在Thermo Hypersil Gold (5μm,6mm×250mm)实现了多种脂肪酸的基线分离,同时进行柱后质谱分析,确定衍生物的质谱裂解模式,并将此方法运用于莲子及荷叶中的脂肪酸含量分析。