绞股蓝(Gynostemma Pentaphylium Makino)是葫芦科绞股蓝属植物的干燥根茎或者全草,主要分布在我国南部、朝鲜、日本、印度、东南亚地带。秋季采收,除去杂质,晒干,泡茶或者煎汤。近年来的药理研究发现绞股蓝具有降血脂、护肝、抗炎、保护心脑血管、催眠等药理活性。文献报道,绞股蓝含有绞股蓝皂苷、黄酮类、糖类、蛋白质、脂肪、氨基酸、无机元素等成分,其中皂苷和糖类是主要的保健功效成分。目前关于绞股蓝的研究集中在活性成分的提取工艺和绞股蓝皂苷的分离纯化上,对绞股蓝其它成分及药理作用的研究较少。本文从绞股蓝全草的化学成分分离纯化、结构鉴定、生物活性评价三方面进行系统地研究,同时对绞股蓝总皂苷的抗炎活性及作用机制进行了探索。绞股蓝粉末经75%乙醇加热回流提取,制备得到绞股蓝乙醇粗提物。乙醇粗提物经有机溶剂分级萃取,得到四个部位萃取物。对绞股蓝乙醇粗提物及四个极性部位进行抗肿瘤、抗氧化活性的评价,研究结果表明绞股蓝乙醇粗提物经过分级萃取之后,具有抗氧化和抗癌作用的活性物质相对集中在乙酸乙酯和正丁醇部位。综合考虑抗癌细胞实验和抗氧化实验的活性结果,绞股蓝乙醇粗提物经过有机溶剂分级萃取之后,乙酸乙酯相和正丁醇相的活性物质相对较多,因此接下来的研究重心放在乙酸乙酯相和正丁醇相的分离纯化及活性评价上。利用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱、聚酰胺柱色谱、ODS柱色谱等柱色谱分离手段,对绞股蓝乙酸乙酯部位和正丁醇部位的化学成分进行分析,从中分离纯化得到8个化合物。通过化合物的理化性质以及现代波谱手段(1H-NMR和13C-NMR、MS)鉴定它们的结构,分别为:山奈酚-3-O-[2’-反式-香豆酰基-3’-O-β-D-葡萄糖基-3’-O-β-D-葡萄糖芸香苷]、gypenoside XLVI、gypenoside LVI、3,4-二羟苯基-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、ginsenoside Rd、gypenoside LI、gypenoside L、2α,3β,12β,20(S)-tetrahydroxy-25-hydroperoxy-dammar-23-ene-20-O-β-D-glucopyranosyl-(1→6)-β-Dglucopyranoside。其中黄酮类化合物山奈酚-3-O-[2’-反式-香豆酰基-3’-O-β-D-葡萄糖基-3’-O-β-D-葡萄糖芸香苷]和多酚类化合物3,4-二羟苯基-O-β-D-吡喃葡萄糖苷,首次从绞股蓝全草中分离得到。采用人正常肝细胞L02进行样品毒性测定,确定样品安全无毒的浓度范围。在实验浓度范围内探讨了从乙酸乙酯和正丁醇两个活性部位纯化得到的8个单体化合物的抗癌和抗氧化活性。以5-氟尿嘧啶(5-F)作为阳性对照,选取了人肺癌细胞(A-549)和人乳腺癌细胞(MCF)进行样品的抗癌活性测定,结果表明整体上各样品对A-549和MCF细胞抑制率随着浓度的增加而增大,其中化合物5、6、7抗癌效果优于5-F,化合物4的抗癌效果与5-F相当,化合物3、8对两种癌细胞不敏感。化合物1对A-549抑制作用比较平稳,整体上效果和阳性对照相当,但是对MCF细胞最不敏感,抑制效果不明显。化合物2干预MCF整体上效果与阳性对照相当,但是对A-549细胞的抑制作用一般。研究结果表明化合物5、6、7具有较好的抗肿瘤活性,化合物1、4杀死癌细胞具有一定的靶向性。以Vc作为阳性对照,采用DPPH、ABTS、FRAP三种体外检测体系进行8个单体化合物的抗氧化活性评价,在所有抗氧化研究中,化合物1和化合物4均表现了较好的抗氧化活性,其中化合物4的抗氧化活性优于阳性对照Vc,化合物1的抗氧化效果与Vc相当。而其它化合物虽有一定的清除自由基能力,但是效果并不理想。通过有机溶剂萃取、D101大孔树脂富集得到绞股蓝总皂苷(GPMS),其皂苷含量为67.5%。探索了GPMS的抗炎活性及作用机理,MTT实验显示GPMS在31.25~500μg/m L浓度范围内对正常巨噬细胞RAW264.7无毒副作用。GPMS可能通过抑制LPS诱导的RAW264.7细胞因子IL-1β、IL-6的分泌来调控NO的释放,通过下调iNOS、IL-6、IL-1βmRNA的表达水平阻断炎症信息传递通道,抑制活化的MAPK、NF-?(33)信号转导通路调节炎性因子的表达从而显示抗炎活性。