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研究目的:本文旨在研究柿子单宁对巨噬细胞内低密度脂蛋白氧化的抑制作用。研究方法:1、以3%硫乙醇酸盐流体培养基刺激诱导小鼠产生炎性腹腔巨噬细胞,以无血清的RPMI 1640培养液灌洗小鼠腹腔分离获取小鼠腹腔巨噬细胞,在含有10%胎牛血清的RPMI l640培养液中培养,通过显微镜观察细胞形态,台盼蓝染色计数细胞活力,瑞氏染色计算纯度,鉴定巨噬细胞。2、将巨噬细胞分成6组,先加入含LDL的培养液培养24h,然后加入Cu2+进行孵育,同时分别加入不同浓度的柿子单宁,使终浓度分别达10μg/m L、20μg/m L、40μg/m L。CCK-8法检测柿子单宁对巨噬细胞存活率的影响;试剂盒检测MDA、T-SOD、GSH-PX水平;ELISA试剂盒测定Ox-LDL含量;油红O染色观察巨噬细胞内脂滴分布情况;利用荧光探针DCFH-DA检测巨噬细胞内活性氧水平。3、实时荧光定量PCR技术检测NADPH氧化酶相关亚基p47phox、p22phox、p67phox、gp91phox、p40phox的mRNA表达水平。研究结果:1、培养细胞的形态观察:巨噬细胞贴壁培养24h后,倒置显微镜下可观察到细胞形态多样,呈圆形或椭圆形、梭形、不规则形状,且细胞体积较大,胞浆丰富,周围可见少许刺毛状小突起（伪足）;台盼蓝染色结果显示巨噬细胞存活率达95%以上;瑞氏染色染色结果显示巨噬细胞纯度达95%以上。2、与LDL组相比,Cu2+组巨噬细胞内MDA和Ox-LDL水平显著升高（P<0.05）,T-SOD、GSH-PX水平显著下降（P<0.05）,而与Cu2+组比较,柿子单宁干预组巨噬细胞内MDA和Ox-LDL含量显著降低（P<0.05）,T-SOD、GSH-PX均有不同程度升高。经油红O染色观察,正常组巨噬细胞色泽透明,无脂质沉积;LDL组有少量脂质沉积;而Cu2+组巨噬细胞内可见大量脂质沉积,并聚集成滴,而柿子单宁干预组巨噬细胞内脂质浸润现象明显减少。通过DCFH-DA荧光探针测定ROS水平,结果显示,Cu2+组较LDL组巨噬细胞内ROS水平显著升高（P<0.01）,柿子单宁干预组ROS水平显著减少（P<0.01）。3、巨噬细胞内LDL经Cu2+氧化修饰后,NOXs的亚基p22phox、p47phox、p67phox、gp91phox和p40phox的mRNA表达均有不同程度升高,而柿子单宁干预均降低了p47phox、p67phox、gp91phox和p40phox的mRNA表达,且具有统计学意义（P<0.05）,其中gp91phox,p47phox的下调非常显著（P<0.01）。研究结论:柿子单宁对巨噬细胞内LDL的氧化具有一定的抑制作用,柿子单宁可通过抑制巨噬细胞内NOXs介导ROS的产生,从而抑制LDL的氧化修饰作用,进而减轻巨噬细胞的泡沫化程度。