单核细胞趋化蛋白-1在增生性玻璃体视网膜病变中的作用研究

被引量 : 0次 | 上传用户:dxwlzjzxa
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:增生性玻璃体视网膜病变(proliferative vitreoretinopathy,PVR)是有多种炎性因子、炎症细胞和组织细胞参与的损伤修复过程,巨噬细胞在PVR的发病过程中有重要的作用,单核细胞趋化蛋白—1(monocyte chemotactic protein-1,MCP—1)可以特异性地趋化巨噬细胞和淋巴细胞向炎症的部位聚集,而视网膜色素上皮细胞(retinal pigment epithelium,RPE)是其中主要的增殖细胞。本实验研究的目的是(1)评价巨噬细胞调理液(MCM)对培养人RPE合成MCP-1的作用;(2)观察MCP—1对RPE移行的作用和地塞米松和道诺霉素对这种作用的影响,以及细胞信号转导通道阻滞剂对这个过程的作用;(3)观察视网膜脱离后不同时期的临床标本组织中MCP—1的表达与巨噬细胞和淋巴细胞的关系。 方法:(1)在培养人RPE的培养液中加入20%培养人巨噬细胞调理液(MCM)、白细胞介素—1β(IL—1β)或肿瘤坏死因子—α(TNF—α)(0.2,2,20ng/ml)培养2、4、8、16、24和48h后,对培养细胞爬片进行免疫组化和原位杂交染色,并对培养RPE的上清液作Western blot检测MCP—1的含量。同时在培养液中加入地塞米松(10-8,10-7,10-6M)或道诺霉素(2μg,20μg,200μg/L)重复上述实验,观察在此条件下MCM对MCP—1合成的作用;(2)处于生长融合状态的单层RPE用剃须刀片刮出一片无细胞的区域,在无血清培养液中加入MCP—1、IL—1β和TNF—α,培养20h后计数进入刮痕区的细胞,观察这些因素对RPE移行的作用。同时另设实验组在培养液中分别加入MCP—1中和抗体、地塞米松、道诺霉素、蛋白激酶C抑制剂(Calphostin C,CC)和钙离子通道阻滞剂维拉帕米(Verapamil,Ver),观察这些条件下MCP—1对RPE移行作用的变化。最后用MTT法检测了MCP—1对RPE的促增殖作用;(3)选用视网膜手术取材标本,包括裂孔源性视网膜脱离视网膜下液中的细胞成份,B级PVR玻璃体手术集取物以及PVR C/D级的视网膜增殖膜,免疫组化法检测其中MCP—1、CD68和CD3的表达状态。 结果:(1)Western blot检测表明培养的人RPE在无药物作用的条件下,MCP—1的分泌为阴性,20%MCM、IL—1β和TNF—α培养条件下,2h时可以检测到分泌的MCP—1,而且随着时间和药物浓度的增加而上升,并在16h达到较高水平,但是MCM培养过程中MCP—1的分泌浓度较低,约为IL—1β条件下的1/5。原位杂交和免疫组化结果验证了Western blot的结果。加入地塞米松
其他文献
糖尿病肾病是糖尿病的主要慢性并发症之一。在欧美、日本等发达国家,糖尿病是导致终末期肾衰竭的主要诱因。肾小球滤过率是反映肾功能的主要指标。近年来,国内外大量研究证明
目的观察热毒宁注射液与青霉素类注射剂联用输液并发症状的临床预防方法。方法选取2012年1月至2015年1月136例在我院需要进行热毒宁注射液联合青霉素类注射剂输液的患者进行
近几年来,智能交通系统(ITS)越来越受到人们的广泛重视,它是在当代科学技术充分发展进步的背景下产生的,旨在将先进的计算机技术、通信技术、数据库技术、人工智能等运用于交
本文从网络技术的角度出发对新媒体的发展模式进行了简单的研究。,首先,对新媒体传播、技术与社会三者之间的关系进行了论述,接下来叙述了新媒体的价值和使用价值,最后对新媒
随着城市建设进程的加快,城市中的大气、水体等环境质量遭到严重的破坏,人居环境受到威胁。在环境保护意识不断提高的今天,人们迫切希望改善居住环境。本文就如何构建满足生
目的了解医务社会工作者在社区卫生服务工作中的作用。方法月坛社区卫生服务中心聘用符合条件的10名医务社会工作者,按照《医务社会工作者工作手册》进行培训后工作于月坛社
人民币贸易结算有利于缓解全球金融危机对中国经济尤其是对外贸易的冲击。但是,人民币贸易结算更重要更深远的意义在于它启动了人民币国际化的进程。改革开放30年的巨大成就
目的制备胶原-纤维蛋白胶双层复合材料,评估其作为皮肤组织工程材料复合人脐带间充质干细胞(h UCMSC)修复小鼠全层皮肤创伤的效果。方法制备胶原-纤维蛋白双层材料,扫描电镜
数感是指对数的含义、数的顺序大小、数的多种表达方式、数的运算及结果的准确感知和理解等.学生数感的形成不会一蹴而就,需要教师较长时间地培养,在学习过程中逐渐体验和建
为了帮助微小企业、个体户及其他个人持续一段时期享受增值税和营业税起征点的税收优惠政策,笔者设想在Excel的IF函数、vlookup查询函数及数据有效性功能的支持下,应用营业额